雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDRmRNA表达的影响.pdfVIP

上海 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) JournalofShanghaiJiaotongUniversity(MedicalScience) 文章编号：0258—5898(2008)11—1474—02 ·短篇论著 · 雌激素对卵巢切除大鼠肾脏 VDRmRNA表达的影响 周 筠 ，‘ 张 桦 ， 蔡德鸿 (1．同济大学 同济医院内分泌科 ，上海 200065；2．南方医科大学 珠江医院内分泌科 ，广州 510282) 摘 要 ： 目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大 鼠肾脏维生素D受体 (VDR)mRNA表达的影响。方法 25只成年雌性sD大鼠 随机分为为假手术组 、OVX组 、OVX+补充雌激素组、OVX+补充孕激素组和OVX+补充雌、孕激素组(n=5)。于分组处理 2月 后处死大 鼠取肾脏组织 ，RT—PCR检测各组 VDRmRNA的相对表达量 。结朵 OVX组大 鼠肾脏 VDRmRNA表达显著低于假手术 组 (P0．05)；与 OVX组相 比，OVX+补充雌激素组和 OVX+补充雌 、孕激素组大 鼠肾脏 VDRmRNA表达显著增加 (P0．05)。 结论 OVX大 鼠肾脏组织VDRmRNA表达减少；雌激素能促进 OVX大 鼠肾脏组织VDRmRNA的表达。 关键词 ：雌激素； 孕激素 ； 卵巢切除； 肾脏 ； 维生素 D受体 中图分类号 ：R一33； R459．1； R589．5 文献标志码 ：B 骨质疏松症是一种多因素性疾病 ，雌激素和维 苯甲酸雌二醇 5Ixg／次)、OVX+补充孕激素组 (肌注 生素D (VitD)合成分泌减少是绝经后妇女骨量丢 黄体酮 1mg／次)和 OVX+补充雌 、孕激素组 (肌注苯 失加速 、骨密度低下的重要危险因素。近年来 ，雌激 甲酸雌二醇5 g／次和黄体酮 1mg／次)。上述给药均 素和VitD在调节骨、钙代谢方面的联合作用逐渐受 于卵巢切除术后45d开始，隔 日1次 ，持续2个月。 到国内外学者的重视 ～’。有研究 认为，雌激素 1．2．2 RT—PCR：用于检测大鼠肾脏组织 VDRmRNA 通过调节肠道 VitD受体 (vitaminDreceptor，VDR) 表达。各组大鼠均于末次干预给药后次 日上午 ，禁食 的表达来影响钙的吸收；此外 ，雌激素还可影响VitD 4h，3％的戊 巴比妥钠 (0．1mL／lO0g)腹腔麻醉，右 对成骨细胞的作用。本研究观察雌激素对卵巢切除 心室彻底抽血处死。立即分离肾脏，用冰生理盐水 (ovariectomy，OVX)大鼠肾脏组织 VDRmRNA表达 清洗 ，一步法抽提肾脏总 RNA，用随机引物 、AMV逆 的影响，旨在初步探讨雌激素调节骨 、钙代谢的可能 转录酶将等量 RNA逆转录成 cDNA，然后以cDNA为 作用机制 。 模板进行PCR扩增。用于扩增 VDRcDNA片断的引 物序 列如下 ：5-ATGGCCATCTGCATCGTCTC一3’(上 1 材料与方法 游引物)，5-GCACCGCACAGGCTGTCCTA一3’(下游引 1．1 材料 物)，扩增片段长度为306bp。内参 GAPDH引物序 1．1．1 实验动物：健康成年雌性 sD大鼠25只，3月 列如下 ：5’．TTCATTGACCTCAACTACATG一3’(上游引 龄，体质量200～230g，由南方医科大学实验动物 中 物)，5’．GTGGCAGTGATGGCATGGAC一3’(下游引物)， 心提供。动物生产许 可证号 ：SCXK(粤)2006— 扩增产物大小为443bp。扩增产物经 1％琼脂糖凝 0015；动物使用许可证号 ：SYXK(粤)2006—0074。 胶电泳后 ，图像分析仪进行光密度分析。 所有动物均一般饲料喂食，自由摄食 、饮水 。