咪唑立宾通过减少p27kip1蛋白降解抑制大鼠系膜细胞增殖.pdfVIP

咪唑立宾通过减少927¨州蛋白降解抑制大鼠系膜细胞增殖 刘书馨 谢院生 陈香美 吕杨 傅博 尹忠 洪权 0085 解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室 (北京1 3) K摘要习目的 免疫抑制剂咪唑立宾(MZR)在临床已被用于治疗IgA肾病、狼疮性肾炎等 系膜增殖性肾小球疾病，可以减少尿蛋白，稳定肾功能。但MZR能否直接抑制系膜细胞增殖 及其机制如何，目前尚不清楚。系膜细胞的生长是在细胞周期水平由各种细胞周期调节蛋白 的精密调控来完成的，包括正调控蛋白——细胞周期蛋白(Cyclins)和细胞周期蛋白依赖 性蛋白激酶(CDK)和负调控蛋白——细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物(CKI)。体内外 研究均显示在系膜增殖过程中存在细胞周期调节蛋白表达的变化。因此，本研究以细胞周期 调节蛋白为切入点，从体外研究的角度探讨MZR抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖的机制，为临 床应用MZR治疗系膜增殖性肾小球肾炎提供基础理论依据。方法原代培养的大鼠系膜细 Blot检测促进细胞增 数；BrdU标记法检测s期细胞；流式细胞仪检测细胞周期：Western 的S期激酶相关蛋白2(Skp2)蛋白的表达；免疫荧光染色检测p27¨以的表达与定位；实时 刺激组、20％FCS+MZR组，Western 结果 MZR剂 Blot检测p27¨¨和Skp2蛋白的表达。 量依赖性抑制20％FCS刺激的大鼠系膜细胞增殖，诱导细胞出现G1／S阻滞。与20％FCS组相 比，20％FCS+MZR组cyclinD1、cyclinE、CDK2的表达下调(P0．05)，p27¨以的蛋白 MZR升高p27¨以蛋白水平的作用。结论MZR能够有效抑制系膜细胞增殖。MZR能够下调系 制细胞由GO／G1期向S期转化，诱导系膜细胞出现G1／S阻滞。MZR上调p27“叫的蛋白表达 至少部分是通过抑制Skp2介导的p27n一降解实现的。上述结果为临床应用MZR治疗系膜增 殖性肾小球疾病提供了基础理论依据。 220