低剂量+CsA逆转恶性实体肿瘤MDR的临床和实验研究.pdfVIP

低剂量 CsA 逆转恶性实体肿瘤MDR 的临床与实验研究 张晓春徐功立 高聆 马金龙 王兰芳 山东省立医院肿瘤研究治疗中心 恶性肿瘤细胞对抗癌药物产生多药耐药性（multidrug resistance, MDR）是肿瘤化疗失败 的主要原因，也是化学疗法介入肿瘤治疗以来一直悬而未决的重要问题[1]。MDR 是指肿瘤细胞对 一种抗肿瘤药物耐药的同时，对其他结构和机制不同的药物也产生了耐药性[2]。MDR 的发生机制 很复杂，其中多药耐药(mdrl)基因编码的p-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)高表达为其主要机制 [3] [4] [5] [6] [7] 。此外，多药耐药相关蛋白 、肺耐药蛋白 、DNA 拓扑异构酶Ⅱ 、谷胱甘肽S 转移酶 和DN [8] A 修复机制 等都参与了耐药的发生。因此如何克服MDR，探寻可逆转或降低肿瘤耐药性的“化疗 增敏剂”或逆转剂，以提高现有抗癌药物的疗效，控制肿瘤复发，最终使患者获得治愈，提高肿 瘤病人的生存率，已成为当前研究的重要课题。自Tsurno 等[9]报道异博定(verapamil，VRP)具有 逆转肿瘤细胞耐药性以来，相继发现了环孢菌素、三氟拉嗪、三苯氧胺等数种化学增敏剂，但它 们因具有心血管毒性、肾毒性、免疫抑制及骨髓毒性等而使其临床应用受到限制。近年来，国内 外已有环孢菌素A(cyclosporin A, CsA)逆转血液恶性肿瘤MDR 的报道[10、11]，总有效率为70%左 右。国外有人也进行了CsA 逆转实体恶性肿瘤MDR 的Ⅰ、Ⅱ临床试验[12、13、14]，所用剂量为8～16 mg/kg/d，但其副作用较大，患者多不能接受。目前国内尚未见相关报道。因此，筛选高效、低 毒的逆转剂势在必行。本研究对MDR 阳性患者随机分组，在化疗同时服用低剂量CsA，观察并比 较其临床疗效、毒性及对免疫功能的影响，并对耐药细胞株进行体外逆转MDR 的研究，其目的在 于从临床研究和实验研究两方面进一步验证口服低剂量CsA 逆转恶性肿瘤MDR 的作用，并从多角 度探讨其作用机制。 临 床 研 究 一、一般资料 1、病例纳入标准 ⑴ 本研究选择非小细胞肺癌(NSCLC)、乳腺癌为观察对象； ⑵ 具有病理学诊断依据且组织学分型明确者； ⑶ 临床分期Ⅲb、Ⅳ者(UICC)国际TNM 分期标准[15]或手术后或放化疗后复发患者； ⑷ 所有患者均有可评价疗效的客观观察指标； ⑸ 卡氏(Karnofaky)评分[15]在60 分以上者或ECOG 评分0～2 分； ⑹ 预计生存者3 个月以上； ⑺ 无严重的心、肝、肾功能异常及明显化疗禁忌症； 2、、临床资料：全部病例共76 例，其中男性26 例，女性50 例，年龄最大45～72 岁，平 均年龄56.6 岁，其中40 岁以下者8 例，40～60 岁者50 例，60 岁以上者18 例。肺癌43 例，Ⅲ b 期30 例，Ⅳ期13 例；鳞癌21 例，腺癌19 例，腺鳞癌3 例，其他3 例。乳腺癌33 例，Ⅲb 期 8 例，Ⅳ期25 例；单纯癌15 例，浸润性导管癌16 例，腺癌2 例。 二、方法： 1、检测方法 76 例患者石蜡组织切片均来自我院 1997 年 1 月至2000 年 12 月间的档案标本，所有标本 均有明确的病理诊断。标本经 10%福尔马林固定，石蜡包埋，4mm 连续切片，进行免疫组织化学 染色。组化试剂:鼠抗人多耐药基因(p-糖蛋白、P-gP)单克隆抗体、大鼠抗人多药耐药相关蛋白 单克隆抗体(MRP)、鼠抗人肺癌耐药蛋白(LRP)单克隆抗体、兔抗人谷胱甘肽-S-转移酶 π(GSTπ) 多克隆抗体，均为美国Santa 公司产品(一抗)。工作浓度为1:100。本实验采用SABC 免疫组织化 学染色技术. 2、 治疗方法 2.1 分组 根据免疫组化检测结果将患者按PGP、MRP、LRP、GST 是否阳性分组，凡有一项或一项以上 阳性者均列入MDR 阳性组，若4 项免疫组化均为阴性则列为MDR 阴性组。MDR 阳性组再均衡分层 随机分2 组，环孢菌