Ochrobactrum intermedium DN2发酵培养基优化研究烟碱降解酶.pdfVIP

维普资讯 第 26卷第 6期 食 品 与 生 物 技 术 学 报 VoL26 No．6 2007年 11月 JournalofFoodScienceandBiotechnology NOV． 2007 文章编号：1673—1689(2007)06—0058—06 OchrobactrumintermediumDN2烟碱降解酶 发酵培养基优化研究 李 颖， 袁勇军， 陆兆新， 别小妹 ， 吕凤霞 (南京农业大学 食品科技学院，南京 210095) 摘 要：研究工作中筛选得到一株有较强烟碱降解能力的新型烟碱 降解细菌Ochrobactru inter— mediumDN2，对其产烟碱降解酶的发酵培养基进行了优化。采用Plackett—Burman设计法，对影 响Ochrobactrumintermedium DN2产烟碱 降解酶的15个因子进行了筛选。结果表 明，影响该菌 发酵产酶的显著因子为：烟碱 、酵母膏、葡萄糖 、tween一80的质量浓度和培养基初始 pH。在此基础 上，采用响应曲面法对以上 5个显著因子进行 了优化 。得到各因子最佳水平为：烟碱 2．183g／L， 葡萄糖 0．823g／I，酵母膏0．844g／I，Tween一8O0．976g／I，初始pH6．9。在此优化条件下获得 实际酶活为 7943U／I，与预测值 8060U／i相近 ，比优化前提 高了5296／。 关键词 ：烟碱 降解酶；优化；Plackett—Burman设计法；响应 曲面法 中图分类号：Q815 文献标识码 ：A M ediaOptimizationof hrobactrum intermedium DN2for Nicotine—DegradingEnzyme LIYing， YUAN Yong—jun， LU Zhao—xin， BIEXiao—mei， LUFeng—xia (CollegeofFoodScienceandTechnology，NanjingAgricultureUniversity，Nanjing210095，China) Abstract：Inpreviousstudy，itwasfoundthatOchrobactrum intermedium DN2wasakindof bacteriawhich candeyradnicotine．Plackett—Burmandesignwasusedtoevaluatetheimportance ofthefifteenfactorswhichmayaffecttheproductionofnicotine—degradingenzymeofDN2．The significantfactorswere listedasfollows：nicotine、glucose、yeastextract、Tween一8O and initial pH．Thenthecentralcompositedesignandresponsesurfaceanalysiswereusedtodeterminethe optimallevelsofthefivesignificantfactors．Theoptimizedconditionswere listedasfollows： nicotine2．183g／L、glucose0．823g／Lyeastextract0．844g／ITween一8O0．976g／L，initialpH6． 9．Withtheoptimum conditions，ahighestenzymeactivitywasachievedto(8010U／L)，which wasclosetothepredicatedvalue7943U／Iandwashigh52 thanthatofthecontro1． Keywords：nicotine—degradin