普鲁兰基肿瘤靶向纳米粒的体外抑瘤效应和细胞摄取途径研究【精选】.pdfVIP

医学研究生学报2015年2月 第28卷 第2期 JMedPost~ra，Vo1．28．No．2，February。2015 ·127 · 论 著 (基础研究) 普鲁兰基肿瘤靶向纳米粒的体外抑瘤效应和细胞摄取 途径研究 郏亚静，陈红丽，唐红波，周志敏，张明明，邢雪琨 ，丰慧根 【摘要】 目的 叶酸受体在某些肿瘤细胞表面的高表达给靶向治疗提供了理论依据。文中制备肿瘤靶向性 自组装纳米 药物载体 ，探讨其体外细胞抑瘤效应及其细胞摄取途径，评价作为靶向纳米药物载体的可行性。 方法 透析法制备包载表 柔比星的乙酰普鲁兰叶酸偶合体 (oflateconjugatedPA，FPA)纳米粒 (FPA／EPINP)，MTS法考察该抗肿瘤药物载体对于肝 癌细胞(HepG2，叶酸受体阴性细胞株)和宫颈癌细胞(Hela，叶酸受体高表达细胞株)的抑瘤效应。细胞实验分为纳米粒对照 组、氯丙嗪组、氯喹组 、阿米洛利组和叶酸组。对照组不经各种抑制剂预处理，直接加入FPA／EPINP悬液，37℃孵育2h，用流 式细胞分析仪检测荧光强度。 结果 纳米粒呈球形 ，FPANP粒径为 (204．2±10．9)Bin，FPA／EPINP粒径 (273．4±11．0) nm，FPA／EPINP载药量和包封率分别为(6．45±1．40)％和(72．45±11．50)％。当HepG2和 Hela细胞分别与5、40、200、400 和 1000Ixg／mL的FPANP孵育24h时，细胞存活率均95％；孵育72h时细胞存活率高达90．O％。FPA／EPINP作用 HepG2 细胞24h时，存活率分别是 (92．3±5．2)％、(70．4±4．6)％、(54．0±4．0)％、(41．1±4．1)％和 (27．04-3．6)％。与纳米粒对 照组相比，用氯丙嗪、阿米洛利、叶酸分别预处理 Hela细胞，纳米粒的摄取量均减少 (P0．05)；用氯丙嗪、阿米洛利分别预处 理HepG2细胞，纳米粒的摄取量均下降(P0．05)。FPA／EPINP作用HepG2和 Hela细胞72h时半数抑瘤浓度分别为 168 xIg／mL和 105xIg／mL。 结论 对于HepG2细胞，FPA／EPINP主要通过网格蛋白介导的内吞以及巨胞饮途径进入细胞，对于 Hela细胞，主要通过网格蛋白介导的内吞以及叶酸受体介导的途径进入细胞。FPANP有望成为一种新型的肿瘤靶向药物载体。 [关键词】 普鲁兰多糖；叶酸受体；纳米粒；靶向抗肿瘤；细胞摄取 [中图分类号】 R318．08 [文献标志码】 A [文章编号】 1008．8199(2015)02-01274)4 CellularuptakeofTumor-atrgetednanoparticlesderivedfrompulhlanaceatteconjugate JIAYa-jing，CHEN Hong—li，TANGHong．bo，ZHOU Zhi—min，ZHANG Ming．ming。，XING Xue．kun， FENG Hui—gen (1．SchoolofLfieScienceandTechnology，XinxiangMedicalUniversity，Xinxiang453003，Henan，China；2．Department ofPharnm~，BeijingObstetricsand GynecoolygHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100026，China；3．1nstaute ofBiomedicalEngineering，ChineseAcademyofMedicalSciencesPeking UnionMedcialCollege，Tianjin300192，hCina) [Abstract] Objective Folatereceptors(FRs)，overexpressedonthesurfaceofavarietyoftumorcells，arepotentialtargets fortumortragetingtherapy．T