赤潮异弯藻培养特性初步研究.pdfVIP

赤潮异弯藻的培养特性的初步研究 李东侠 钱风云1 丛成 欧阳藩 (中国科学院化工，e金研究所生化工程国家重点实验室，北京100080) (1山东大学生命科学学院微生物工程专业96级实习生) 摘要本文对一种单细胞海洋擞藁一一赤潮异弯藻的室内培养进行了初步的研究．研究了算生长规律， 包括培养温度，pH-值及光强等外部培养蒂件对其生长的影响．在此基础上，用正交实验的方法，研究 了N、P，NaHCO】及V舶对它生长的影响，优化了培养基成分．实验结果表明，当温度高于20℃时， 随着温度的升高，生长速率战小：口H在6．0—8．0之间长势良好：光强在O．5一IOmW／cm2范围内时生 长速率随光强增加呈浙增趋势；另外，还对谊藻对有机氮源的利用情1兄进行了初步的考察，结果表明， 谊藻基本不利用有机氟源． 关键词 赤湖异弯藻， 室内培养， 生长特性 赤潮异弯藻(Heterosigmaakashiwo)曾被报道【1l在北美太平洋沿岸海水养殖区引起了大量的 鱼类死亡，另外，在世界上其它地区特别是智利、日本、新西兰和西班牙等地也曾有过类似的报 道。中国也曾多次发生过该种赤潮127。”l。因此，国内外学者对其生理、生态及生化进行了研究， 结果发现，赤潮异弯藻能够积累多种生理活性物质，如多不饱和脂肪酸(PUFA)13 4。’l，特别是 过关于该种的生长特性的报道j-“】．国内尚未见关于其室内培养的系统描述，而且，采自不同海 域的藻株的生理特点不完全～致，可能属于不同的生理宗。本文对其室内培养特性进行了初步研 究，以期为进一步研究其生理活性物质的代谢调控提供依据。 1．实验材料和方法 akashiwo)，由中国科学院海洋研究所提供。关于其种的详 1．1藻种赤潮异弯藻(Heterosigma 细描述及生理、生态特点见文献I“。 1．2培养基 1．2．1改进的f／2培养基除海水用市售的海水盐INSTANTOCEAN配制的溶液代替外，其它成 分同f／2培养基o。。 1．22Botryococcusreedium人工海水培养基”1 1．3接种物和接种取培养十天左右的藻液，按所要求的接种量接入新鲜培养基中。 (单位：小时)，每光照12小时按一天计算。 L5细胞计数实验中采用血球计数板计数。因藻液浓度一般在104一106个／ml，故不用稀释。因 该藻具有鞭毛，游动性给计数带来不便，本实验中采用3％甲醛将细胞固定。 1．6藻体生长的测量 2．结果与讨论 2．1赤潮异弯藻在静置培养过程中的生长 考察赤潮异弯藻在室内培养的正常生长周期，为进一步研究代谢调控寻找依据，在温度为22 ℃，口H值为7．0，光照为1．0mW／cm2，初始接种密度为3×103个／ml条件下进行静置培养，每两 天计数，测定其生眭以及pH变化情况．结果如图1所示。 70 8．O 60 50 篡 差 差 40 6．8 1b s 30 6．4挈 二 20 10 ：：毛著 耋 0 52 曩 鲫阳∞酣¨卸仰0 0 2 4 6 8 10 14 12 1618加趋 培井时间(YO NIHCOI加量(g／I) 田I藻细胞静置培养的时阃进程 图2 Na／{C0：的加量对藻细胞生长的影响 ltimecollrseofH．al：mkhpoculnlre佃staticflasks Effect oi1 ofH