67kDa层粘连蛋白受体在胃癌组织中的表达和其意义.pdfVIP

中国癌症研究进展@ 67kDa层粘连蛋白受体在胃癌组织中的表达及其意义 李晓玲王艳萍吴东瑛张素敏徐蕾辛彦 稿聃s贞法 年龄约56岁。按全国胃癌协作组制定的有关胃癌大体分型、组织学分型、临床病理分期等规 范进行严格病理诊断。其临床分期：早期胃癌6例，中期胃癌17例，晚期胃癌77例。伴有淋t 巴结转移者66例，无转移者34例。全部病例无临床辅助检查可见的其他脏器转移癌，并均有 5年以上的跟踪随访。每例患者均选择癌组织、癌与正常组织交界处和淋巴结转移癌组织的 常规石蜡包埋蜡块各1枚，制做成4／1m厚的切片以备免疫组化应用。每块组织的连续切片 中，均取一张留做HE染色对照。 kDa kDa 2．试剂67 ABC试剂盒为Vector公司产品，工作浓度1：100。 kDa 3．免疫组化染色厦抗原修复67 LN-R免疫组化染色主要步骤：①石蜡切片常规脱 蜡人水。②3％H2Q(甲醇稀释)消除内源性过氧化物酶，室温下20rain。③在pH6．0柠檬酸 缓冲液中，采用高压热变性方法去除由于甲醛固定造成的抗原遮蔽作用【6J，并在缓冲液中加 PBS稀释的正 入0．4％叠氮钠(NaN3)以抑制背景显色，高压热变性的时间为90s。④用1：10 常马血清封闭15mAn(室温)。⑤加1：50的鼠抗人67kDaLN．R单克隆抗体，置于37℃恒温 箱中60min。⑥加1：200的生物素标记兔抗鼠二抗，37℃60 物，室温下40 冲洗3次，每次约5man。 4．免疲组化染色对照每次染色均设置阳性对照和阴性对照，以确保结果的可靠性。阳 性对照：通过预实验筛选出阳性反应病例蜡块，制成连续切片，每次染色均用该已知阳性切片 作为阳性对照。阴性对照：用PBS代替第一抗体，其他步骤同实验组。 kDa 5．免疫组化结果判定凡在细胞膜及细胞浆中见清晰褐色颗粒者为67 LN．R阳性 细胞。根据阳性细胞在同类细胞中所占比例的多少，将免疫组化染色结果分为4个等级。阳 本课题受国家自然科学基金项目资助(No 作者单位：110001沈阳，中国医科大学肿瘤研究所第四研究室 67k随层粘连蛋白受体在胃癌组织中的表达及其意义 131 6．统计学处理采用f检验和Log-rank检验，对免疫组化结果和胃癌患者的生存资料进 行分析处理。 结 果 1．正常胃粘膜及癌旁非癌胃粘膜中67 kDa 胞浆中可见表达。癌旁胃粘膜中，67 LN．R在胃体腺壁细胞胞浆中有较强活性的表达。 67kDa LN-R在肠上皮化生粘膜中多在游离缘胞浆或膜上表达。 kDaLN-R在本组胃癌组织 kDaLN-R的表选67 2．胃癌组织厦淋巴结转移癌组织中67 kDa 中的阳性表达率为54．O％，67LN．R表达多位于细胞胞浆中，少数在膜上表达，反应强度 达部位在细胞膜及细胞浆中。 3．67 kDaLN-R表达 klMLN-R在胃癌组织中的表达与胃癌病理生物学行为的关系67 kDaLN-R与胃癌的 与胃癌组织学类型、Lauren分型、淋巴结转移无明显相关(P0．05)，67 胃壁浸润深度和临床病理分期星正相关(表1，2)。