磁性纳米微球研究及其在法医学中应用.pdfVIP

法医物证学 磁性纳米微球研究及其在法医学中的应用 刘小芳1，于子辉2，姜伯玮3 (1．北京市公安局昌平分局刑侦支队，北京102200； 2．北京市公安局刑事侦查总队，北京100192；3．中国科学院上海应用物理所，上海201800) 【摘要】纳米材料科学的发展催生了利用复合纳米磁性微球进行核酸、蛋白质等生物大分子的分离纯 化生化分离技术。本文对磁性纳米微球及其制备进行了论述，讨论了磁性纳米微球在法医DNA提取纯化的 应用价值。 【关键词】法医物证学；磁性纳米微球；应用；进展 法医DNA检验需要简单易行、快速、稳定、高通量且能够从各种生物检材中提取DNA，并可直 接用于后续PCR反应的DNA提取方法。传统的DNA提取方法操作步骤烦琐，浪费大量的时间，已 经不能满足法医DNA检验的要求。近年来，随着纳米材料科学的迅速发展，基于磁性纳米微球的磁 性分离技术已被广泛应用于DNA的提取和纯化。与传统的DNA提取技术相比，这些基于磁性微球的 DNA提取技术具备操作简单、提取速度快、效率高、不使用有毒有机溶剂、容易进行磁性分离等众 多优势。本文对相关研究进展进行综述，以供同行参考。 1磁性纳米微球的结构、特性及制备 1．1磁性纳米微球的结构 复合而成的新型材料，具有一定磁性及特殊表面结构。根据无机磁性纳米粒子与提供活性功能基团的 材料形成的方式不同，可分为核壳型(磁性核或磁性壳型)、混合型、多层型，其中研究较多且具有 广泛应用前景的主要是核壳型磁性高分子微球。 1．2磁性微球的主要特性 表面积比大，微球官能团密度和选择性吸附能力增强，吸附平衡时间缩短；具有超顺磁性，可以 避免在使用过程中磁性纳米粒子之间的磁性团聚；理化性质稳定，具备一定的机械强度和化学稳定 性，能耐受一定浓度的酸碱溶液和微生物的降解，其内含的磁性物质不易被氧化，磁性能不易下降， 具有生物相容性，不会对生物体造成明显伤害；具有或通过共聚及表面改性可带有多种活性的功能基 团，可连接生物活性物质(如核酸、酶等)或偶联特异性分子(如抗原、抗体、特异性配体等)…， 在外加磁场作用下进行专一性的核酸和蛋白质分离悼1。 1．3磁性纳米微球的制备 磁性微球由无机磁性材料与各种提供活性功能基团的材料复合制备而成。目前常用的有金属合金 铁(Fe。N)等，其中Fe，0。应用最多，易在水溶液中通过共沉淀或氧化共沉淀制备，其粒度、形状 和组成可以由调节反应条件来控制。常用提供活性功能基团的材料分为3类：天然生物大分子材料、 无机物材料和合成高分子材料。天然生物大分子与生物体的亲和性好，无毒副作用，用于磁性材料改 性等方面的研究较多，可用于制备磁性靶向药物载体。制备方法主要包括单体聚合法、共混包埋法、 共沉淀法、界面沉积法以及原位法5大类。在目前研究的纳米复合微球的制备技术中，以单体聚合法 167 主国洼匿堂堡坠皇塞壁剑堑盛墨擅选=全国箜担达洼医堂盔塞逾金迨塞塞 最多，尤其是近年来研究建立的细乳液聚合法。该方法制得的高分子微球磁响应性强，形状较规则， 呈圆球状，粒度分布较均匀，是一种最适宜得到有机／无机杂化复合磁性纳米微球的制备方法。 上述方法均为化学法，此外磁性纳米颗粒的制备方法还有物理法和生物法。物理法主要涉及蒸 发、熔融、凝固、形变、粒径变化等物理变化过程，主要包括机械粉碎法、冷冻干燥法、蒸发凝聚 法、离子溅射法等。物理法制备的纳米粒子受粒径分布较宽、易混入杂质、引起化学变化、颗粒团 聚、难以获得纳米级磁性微球等条件限制，因此已很少应用于磁性纳米微球的制备。生物法是指通过 一定的方法直接将广泛存在于生物(如趋磁细菌)体内的纳米磁性微球提取出来。这些直接来源于 生物体内的磁性纳米微球主要是一些铁氧体，具有大小均匀(50一lOOnm)、不团聚、易降解、无毒、 了单核苷酸多态性的自动化检测。但此法提取过程也较为烦琐，很难大量合成；所得到的粒子的粒径 可控范围也比较受限制。 2磁性纳米微球在DNA提取中的应用 2．1原理及主要步骤 磁性纳米微球在特定的条件与DNA发生强烈的吸附作用，在外磁场作用下将吸附有DNA的磁性 微球固定而去除外在液体，最后在特定