四种方法检测超广谱β-内酰胺酶的敏感性比较.pdfVIP

亡盎医堂2004年5月第25卷第5期 ·52l· 四种方法检测超广谱』3一内酰胺酶的敏感性比较 叶枫1钟淑卿1张天托2钟南山1 1广东省广州呼吸疾病研究所(广州510120)；2中山大学附属第三医院(广州510630) 【摘要】 目的比较4种方法检测超广谱口一内酰胺酶(ESBLs)的敏感性。方法用纸片扩散初筛法从临床 分离的105株肠杆茵科细茵筛选出可疑产ESBLs的菌株，同时用纸片扩散确证法、双纸片协同法、浓度梯度法 (Etest)和Vitek32型全自动分析系统药敏检测卡GNS一506进行ESBLa的检测。结果共检出ESBLs菌株42株。 100．0％。结论纸片扩散确证法简便、准确，适用于各级医院常规应用。头孢噻肟检出ESBLs的敏感性明显高于 头孢他啶。 【关键词】p一内酰胺酶类药物耐受性微生物敏感性试验 咫÷ ；、 超广谱p一内酰胺酶(extended—speetmm口一laeta．标准委员会(NCCIS)推荐的ESBLs表型筛选方法进行。 nlase,8，EsBk)是导致革兰阴性杆菌对新型头孢菌素耐1．2。2纸片扩散确证法…1按NCCLS推荐的纸片扩 药的主要原因。质粒介导的ESBLs能使其产生突变基散确证法测定ESBLs试验指南进行。采用头孢他啶、 因传递到同种或异种菌株，使更多的细菌耐药，对临床 头孢他啶／克拉维酸和头孢噻肟、头孢噻肟／克拉维酸 治疗造成极大危害。微生物工作人员能否及时、准确 两对纸片检测，任一组药物的抑菌圈直径差≥5toni 地检测出产ESBLs细菌至关重要。为此，我们同时应时，判定为ESBI．s阳性株。 用4种方法对75株可疑产ESBLs菌株进行检测并比1．2．3双纸片协同法【2J中间贴上替卡西林一克拉 较其结果。 维酸纸片，距此中心距离15．30nlln处(中心一中心) 1材料与方法 上、下、左、右分别贴上。坦、C】Ⅸ、CRo和ArIM纸片， 35℃孵育16—18h。凡上述任一单药纸片和复方纸 1．1材料 片间出现协同作用“坑”或“匙扣”现象者均视为产ES． 1．1．1菌株来源 1999年8月至2000年12月本院临 BL8株。 床分离的105株肠杆菌科细菌，其中大肠埃希菌33 1．2．4Etest法 当头孢他啶与头孢他啶／克拉维酸或 株，肺炎克雷伯菌50株、肠杆菌属细菌22株。质控菌 头孢噻肟与头孢噻肟／克拉维酸的最小抑菌浓度比值 株为大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC 27853和肺炎克雷伯菌ATCC700603。 ≥4倍时，判定为ESBLs阳性株。 1．2．5Vitek机检测 llll 1．1．2试剂头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(crx)、头孢 挑取单个复苏后的菌落于2 0．45％无菌生理盐水，严格参照GNS一506卡说明书， 曲松(CRO)、氨曲南(ATM)、头孢他啶／克拉维酸 配成一定浓度的菌悬液，上Vitek型全自动细菌分析系 (CAZ／CL)、头孢噻肟／克拉维酸(CIⅣCL)的药敏纸片 统，输入相应的细菌名称，经4～20h，仪器自动给出结 购自英国OXOID公司：头孢他啶与头孢他啶／克拉维 果。 酸复合条(IZ／IZL)、头孢噻肟与头孢