高效液相色谱仪在生物医学工程领域应用.pdfVIP

J●■_’。＼ 《黝鳃近扁壁吻萨迅煅褫磷澍锤 高效液相色谱仪在生物医学工程领域的应用 李钰1李萍2樊瑜波3 与医学工程学院副教授硕士生导师蜘吨@buaa．edu．cn；3．北京航空航天大学生物与医学工程学院院长 樊瑜波教授博士生导师中国生物医学工程学会理事长国家杰出青年yubofan@buaa．edu．cn) 摘要：高效液相色谱仪是20世纪70年代发展起来的一种现代分离分析仪器，它具有分离效能高、分析速度快、检测 灵敏度好等特点，目前已广泛应用于化学、化工、制药、食品、生命科学、生物工程等领域中进行化合物的定性和定 量分析。本文主要介绍了高效液相色谱仪在环境科学、生物化学、药物分析与生产以及临床医学检验等领域的应用． 关键词：高效液相色谱仪；生物医学工程：应用 1．引言 从1903年俄国植物学家茨维特(Tswett)发表了吸附色谱分离植物色素的论文至今，色谱技术 已有百年的发展历史【11。高效液相色谱(1lighperformanceliquid 相色谱(highpressureliquidchromatography)、高速液相色谱(1lighspeedliquidchromatography)、 resolution 高分离度液相色谱(1dgh liquid 年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的…。高效液相色谱作为一种高效、新颖、快速的分 析方法，已被广泛地应用到化工、食品分析、环境分析、天然产物分析以及医药、生化、临床检验， 等领域中。 高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色 谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效 液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是 高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好，且须在色谱仪中进行。 2．高效液相色谱仪的应用 I-IPLC作为一种十分重要的分离技术，自20世纪70年代初崛起以来，一直受到了高度的重视，被 广泛应用于环境科学、生物化学、药物分析与生产和临床医学检验等领域。如环境方面，HPLC可以 定性定量监测环境中的物质；医药方面，高效液相色谱仪可以分析药物的含量，药物在体内的残留 量，测定药物在体内的代谢情况等：在生化方面高效液相色谱仪可以分离分析与生命密切相关的多 种物质，如氨基酸、肽、蛋白质、核酸、维生素、酶、糖等；临床检验方面可以对疾病的变化通过 对人体组织或体液中的异性物质进行含量改变的分析，对于疾病的诊断和疗效监测将会起到重要的 作用。 2．1环境科学中的应用 PL 近年来，HPLC技术发展较快，HC已在环境监测中得到广泛应用，特别适用于分子量大、 挥发性低、热稳定性差的有机污染物的分离和分析。如多环芳烃、酚类、多环联苯、邻苯二甲酸酯 类、联苯胺类、阴离子表面活性剂、有机农药、除草剂等，其中多数属于美国环保局(EPA)清洁水法 28 PRr，cEEo}nf： I会议文集I 鳃珏脑盎吻萨她嬷舔鄱泗镪≤荔而 案中颁布的114项优先有机污染物范围。在发达国家更是将HPLC方法作为常用的环境监测方法，如美 废水中的草甘膦除草剂；EPA8310方法用LC／荧光分析固体废弃物中的多环芳烃，就连气体中的有害有 机物不少也是用HPLC方法测定例。 2．2生物化学中的应用 蛋白质是生命有机体的主要成分，在生命体生长发育的各个阶段都起着重要作用。蛋白质和多 肽在生物系统中的多样性和复杂性是蛋白质分离和分析中的重要挑战。质谱技术的应用能够在一次 单一实验中分离上千种的蛋白质，而高效液相色谱已经作为一种不可缺少的工具为蛋白质组学提供 有力的实验手段【3J。 物理、化学功能等特征差异是蛋白质分离的基础。根据蛋白质分子疏水性的不同可采用反相高 效液相色谱进行分离14】。根据pH值和所带电荷的差异可采用高效离子交换色谱分离蛋白质。根据分 子相对大小可采用高效凝胶过滤色谱进行分耐列。利用分子特异性结合采用高效亲和色谱分离蛋白 质。高效疏水色谱用来分离构象不稳定蛋白质。在实际应用中进行复杂样品的分离时，通常需要采 用几种分离模式相结合，才能获得理想的目标产物‘61。Perkins等人m鉴定出小鼠单可隆抗体上两