TIMP-1降低无血清培养所致的乳腺癌细胞MCF-7凋亡的研究.pdfVIP

维普资讯 壹 2生 旦箜!鲞筮 翅 hineseClinicalOncology，Dec．2007．v0l|12．N0．12 · 885 · 著 · TIMP一1降低无血清培养所致的 乳腺癌细胞 MCF一7凋亡的研究 210009 南京 江苏省肿瘤医院标本库 周 平 ，高 萍，王 婷 【摘 要】 目的：基质金属蛋白酶组织抑制剂一1(tissueinhibitorofmetalloproteinase一1，TIMP．1)是与乳腺癌预后不良显著 相关的分子。本研究旨在探讨TIMP一1的作用机制是否包括其降低无血清所导致的细胞凋亡。方法：对TIMP．1表达质粒进行 酶切及序列测定；用脂质体转染的方法将含TIMP—l的质粒及对照质粒分别转染到MCF-7细胞中，Westernblot检测TIMP一1蛋 白的表达；在无血清培养条件下，流式细胞仪检测对照质粒转染克隆与TIMP一1稳定表达克隆凋亡的变化。结果 ：与转染对照 质粒的克隆相比，TIMP·1转染克隆中TIMP一1蛋白的表达显著上调。无血清培养条件下，对照克隆细胞相对凋亡率为(7．18± 1．12)％，TIMP一1表达克隆TIO和T13相对细胞凋亡率分别为(2．63±0．39)％和(1．07±0．9)％(P0．05)。结论：TIMP一1过 表达降低无血清所导致的细胞凋亡。 【关键词】 TIMP一1；无血清培养； MCF-7；细胞凋亡 中图分类号：R737．9 文献标识码：A 文章编号：1009～0460(2007)12—0885—04 EffectofTIMP-1ondecreasingapoptosisinducedbyserum-freeinbreastcarcinomacelllineMCF-7 ZHOUP凡g，GAOPing，WANGTing．SpecimenWarehouse，JiangsuCancerHospital，Nanjing210009，China Correspondingauthor：WANG Ting，E—mail：wtdyyl102@hotmail．com A【bstract】 Objective：ToinvestigatewhetherTIMP一1decreasedapoptosisinducedbyserum—free．Methods：TIMP一1一expres． sionplasmidWas identifiedbyenzymedigestandsequencing；TheplasmidcontainingTIMP--1cDNA andcontrolplasmidweretrna s-· fectedrespectivelyintoMCF-7cellsbylipofectamine．ThentheTIMP一1proteinWas identifiedbywesternblot；Cellapoptosisforcon— trolclonesandTIMP一1over—expressionclonesWas analyzedbycytometryintheconditionofserum—free．Results：Th eTIMP一1protein expressionlevelofTIMP一1一transfectedclonesWassignificantlyhigherthanthatofcontrolclones．Therelativeapoptosisratewas (7．18 ±1．12)％forcontrolclonesand(2．63±0．39)％ ，(1．07-4-0．9)％forTIOandT13clones，respectively．Conclusion：TIMP一1de— creasedapoptosisinducedbyserum—free． 【KeyWords】 TIMP一1； Serum—freeculture；MCF-7；Apoptosis 肿瘤作为一种凋亡异常的疾病 ，其