IgA1对肾足细胞分泌VEGF的影响和复方积雪草2号的干预作用.pdfVIP

细胞IDO的表达强度与肾小管问质PCNA阳性细胞数及肾小管间质病理损害程度之间的相关性，发现 肾小管上皮细胞IDO的表达强度和肾小管一间质PCNA阳性细胞数呈显著负相关，与肾小管一间质病理 损害程度之间亦呈显著负相关。 装扩增的腺病毒重组基因组中有目的基因IDO的表达，而Ad①腺病毒空载体转染的293细胞无IDO 表达。HPLC检测显示表达的IDO具有降解色氨酸的生物学活性，因此构建的Ad—IDO腺病毒具有感 染并表达有生物活性IDO的能力。氯化铯密度梯度离心法纯化了Ad-IDO腺病毒，并达到病毒体内转 染所需滴度。重组腺病毒对非包装细胞Hela细胞无毒性，说明无野生型病毒的存在。 3．实验显示在NTN大鼠血清中色氨酸代谢率较正常大鼠显著升高。与IDO未干预NTN鼠相比， Ad—IDO转染NTN鼠的血清色氨酸浓度进一步降低，而犬尿氨酸浓度进一步升高，同时IDO有效转染 了肾组织肾小管上皮细胞，表明Ad—IDO体内注射显著提高了体内IDO的生物学活性。+Ad—IDO腺病 毒转染NTN大鼠的脾脏淋巴细胞凋亡率明显增加，24h尿蛋白显著减少，而肾小球新月体比率明显 降低，肾小球和肾小管一间质浸润的CD4+T细胞和PCNA阳性细胞数也显著减少，各指标与IDO未干 预NTN鼠相比差异显著；相反，腹腔注射l-MT的NTN大鼠其血清色氨酸降解明显减弱，24h尿蛋白． 量显著升高，肾组织病理损伤进一步加重，同时肾小球和肾小管一间质浸润CD4+T细胞和PCNA阳性 细胞数也明显增高，与IDO未干预NTN鼠相比差异显著。 四、结论 1．新月体肾炎患者肾标本中肾小管上皮细胞IDO的表达显著上调，并且IDO的表达强度与肾小 管间质PCNA阳性细胞数和肾小管间质病变程度显著负关性，说明病理条件下肾小管上皮细胞诱导表 达的IDO可通过调控肾小管间质淋巴细胞的功能活性而减缓新月体肾炎肾小管间质的免疫病理损 伤。 2．成功构建了具有转染并可表达生物活性IDO的Ad-IDO重组腺病毒。 3．与正常大鼠相比，NTN大鼠血清中色氨酸降解明显增强，而用卜MT阻断IDO活性后新月体 肾炎的病情显著加重，说明NTN大鼠体内升高的IDO活性在保持新月体肾炎大鼠自身耐受机制而减 缓肾炎病情中具有重要作用。采用Ad—IDO体内转染NTN大鼠可进一步提高大鼠体内IDO的生物活性， 其通过抑制体内T淋巴细胞增殖、促进其凋亡而发挥减缓新月体肾炎病情的生物学效应。因此体内 靶向加强病变肾组织局部IDO活性可望为新月体肾炎的治疗提供新的策略。 A一7l酢，对肾足细胞分泌VE6F的影响 及复方积雪草2号的干预作用 陈洪宇王永钧覃志成 杭州市中医院(yc0822@1—26．—com，T：057185827684) IgA肾病(IgAN)临床表现多样。近来研究显示，IgAN患者血清中存在大量异常糖基化的多聚IgA。， 其中近50％患者呈现高IgA血症，患者血清及沉积于肾小球中的IgA，分子已成为研究IgAN发病机理 116 的热点之一D1。那么IgA。是否也对肾小球足细胞造成损伤呢?为此，我们进行了IgA-对小鼠肾足细胞 血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及复方积雪草2号的干预作用的观察，现报道于下。 一、材料和方法 的培养瓶中进行刺激干预。 2．含药血清的制备：按随机分组的原则，将40只SD大鼠分为四组，分别为正常组、复方积雪 草2号组、缬沙坦组、强的松龙组。正常组鼠每日一次灌胃蒸馏水2ml。其他组按照体表面积公式 取血清、灭活补体、过滤除菌，分装冻存备用。 3．实验验分组 g／ml。实验分为七组：分别为正常组、模型组、 参照文献“1剂量，将IgA。刺激终浓度调至100u 中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组、强的松龙组和缬沙坦组。 4．细胞活力测定：采用胎盘蓝法。 ．5．ELISA法检测培养上清VEGF蛋白含量。 6．RT-PCR检测VEGFmRNA表达：收集上清液，提取细胞总RNA，测定样品的总RNA含量。逆转 CATcTCTCCTATGTGcTGGC一3， GGTGGACATCT