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寒地苹果种质资源核心种质初步构建 张冰冰，宋洪伟，梁英海，张艳波，陶蕊 (吉林省农业科学院果树研究所长春130033) 摘 要：本研究对国家果树种质公主岭寒地果树圃266份寒地苹果资源表型性状评价和 RAPD分子标记聚类结果基础上，采取分层取样法，构建了寒地苹果初级核心种质180份， 对初级核心种质再次进行聚类分析，初步构建了寒地苹果资源的核心种质46份。 关键词：寒地苹果资源核心种质构建 自Frankel提出核心种质概念以来，核心种质作为种质资源管理利用的有效 途径和方法己成为遗传多样性保护的研究热点，它所涉及的多样性度量和评价、 群体的遗传结构与进化、核心材料的抽样方法和策略、核心种质库的变异评价及 应用研究日益增多。极大地推动了世界各地对各类农作物核心种质的相关研究。 依据对寒地苹果种质资源植物学特征进行描述及其对生物学特性、抗性鉴定评价 和RAPD分子标记分析研究结果，构建寒地苹果资源的核心种质，使其能够使 大量的资源群体的优良基因得以保存，又可节省了保存大量资源群体的成本，而 且资源研究与利用的选择性和针对性更加简便、明确。 1材料和方法 1．1材料 资源材料全部采自吉林省农业科学院果树研究所——国家果树种质公主岭 寒地果树圃。材料名称及来源见表1。实验中的RAPD随机引物、Taq酶等均购 自北京天根生物技术有限公司。 表1供试的266份寒地苹果种质资源名称 1．2方法 采用随机引物扩增多态性(RAPD)标记、多次聚类逐级压缩和优先取样构建 核心种质方法。 2结果 2．1RAPD扩增结果 以形态学分类差异较大的有代表性的6份种质作为筛选引物的DNA为模 板，共对200个10碱基的随机引物进行RAPD扩增，以扩增DNA条带型清晰、 差异性和多态性好为标准，最终筛选出用于寒地苹果资源的引物为25个(引物 编号和碱基序列见表2)及扩增RAPD产物图谱如图1-6。 表2：抗寒苹果RAPD—PCR引物及其序列 图l用引物OPA4)I扩增的苹果材料的RAPD图谱 帆左至右(泳道)依次为1～22为苹果122号材料 图2用引物OPA-16扩增的苹果材料的RAPD产物圈谱 从左孥右(泳道)依次为 l～”为苹果23—46号材料 图3用引物OPA-17扩增的苹果材料的RAPD产物图谱 从左至右(泳道)依冼为1～22为苹果119—140号材料 b6 7 8 910川11……617川’202 图4用引物OPB-08扩增的苹果材料的RAPD产物图谱 从左至右(泳道)依次为：卜一24为211—2弭苹果号材料 图5用引物OPH一】2扩增的苹果材科的RAPD产物图谱 从友至右(泳道)依玖为：1～”为苹粜14I164导材料 图6用引物OPV-14扩增的苹果材料的RAPD产物图谱 从左至右(泳道)依次为：I～24为苹果95118号材料 据扩增结果对266份寒地苹果资源进行聚类，结果如图7所示。 钤铛果 紫果涟袭 17号果 苏7 西感l||曩 公58—15-13 苏18 红钤果 公17．．2 北5 公3-2．57 二其孚嘉磊 金红芽专弩荛 公18．70 公144 辽宁l号东光 公19．I．1 旭 2001辜± 赤阳 大秋夯鍪 而4 苏8 苏10 图7 红太平 花红查篙手