GS环保试剂在病理制片技术工作与应用.pdfVIP

GS环保试剂在病理制片技术工作中的应用 田玉旺朱红艳李琳苗金红朱培双邢 宜 (北京军区总医院病理科，北京100700) 【关键词】环保试剂；病理制片；应用 在日常病理组织制片及染色过程中，甲醛和二甲苯作为病理常规试剂被大量应用。这些试剂具有强烈 的刺激性和挥发性，不仅污染环境，而且严重危害身体健康。因此，寻找一种对人体无毒无害且安全的甲 醛和二甲苯替代品，已成为病理技术工作者的一种迫切愿望。本文将环保型“GS组织样本制备及染色套液” 应用于病理技术工作中，收到了理想制片效果。 1材料与方法 1．1标本临床送检的各种活体组织病理标本。一组采用传统石蜡制片方法；另组采用环保试剂制片方法， 比较二者制片后的各种染色效果。如：HE染色、免疫组化染色及组织化学染色。 1,2GS环保试剂GS组织样本制备套液及GS病理切片染色套液(由哈尔滨格林标本技术开发有限公司 研制并生产)。 1,3方法 1．3．1传统石蜡制片法组织经常规10％中性福尔马林固定，酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片， 厚4．5微米。 1．3．2 GS环保试剂制片方法离体新鲜组织标本经下列步骤处理①固定液I1h、固定液1／3h；②脱水液 lh30mim④浸蜡液 Ix2，分别为40min、lh，脱水液Ⅱ×2，分别为30min、lh；③透明液I1h，透明液II I、Ⅱ各lh30min，石蜡包埋，切片，厚4—5微米。 自来水洗：③苏木素染8min，自来水洗；④1％盐酸酒精分化数秒钟，自来水洗；⑤1％氨水返蓝lmin，自 各2rain，中性树胶封片。． 1．3．4 5 GS环保型染液HE染色步骤①切片经脱蜡液I5min，脱蜡液IImin，自来水洗2min；②苏木 3min，无苯封片胶封片。 同常规。 1．3．6组织化学染色胃黏膜组织进行PAS染色，肾组织进行PAMS染色，具体染色步骤同常规。 2结果 2．1采用Gs组织样本制备套液制作的组织蜡块，在切片中感觉组织块软硬适中，切片厚薄均匀，连续性 好，与传统方法制备的组织蜡块切片效果基本相同。脂肪组织、子宫肌瘤及皮肤等组织切片效果优于传统 方法。采用环保型GS染色套液进行HE染色，染液渗透力强，染色速度快，组织结构显示清晰，色彩鲜 艳，核浆对比分明，与传统HE染色结果相}L者无明显差异(图1)。 示，细胞内抗原成分保存良好，阳性结果定位准确，背景清晰，与传统方法制片染色效果基本相同(图2， 3)。 213 2．3 GS组织样本制备套液制作的石蜡切片，肾组织进行PAMS染色，胃粘膜组织行PAS组织化学染色， 结果显示，肾小球基底膜和胃组织中的中性粘液染色清晰，色泽鲜艳，阳性物质定位准确，与传统方法制 片染色效果相同(图4，5)。 3讨论 3．1在组织处理过程中，组织固定至关重要，它直接影响着各种染色效果。采用甲醛固定组织的模式已延 续了一百多年。它对组织渗透能力强，组织固定均匀，组织收缩小，尽管它具有高毒性，但由于其成本低， 能较好地保存组织结构，所以至今仍广泛被人们所接受。甲醛主要存在以下缺点：①易挥发，具有较强烈 的刺激性和腐蚀性【l】，严重造成空气和环境污染，而防护又极为困难。国内外医学研究证实，人体皮肤直 接接触甲醛时，会引发过敏反应、皮炎或湿疹。长期接触甲醛可能会引发慢性呼吸道疾病、癌症发生，如 5日 鼻咽癌、结肠癌、脑瘤、白血病，引起体内白细胞数量下降，导致记忆力和智力下降。2004年6月l WHO正式宣布甲醛为致癌物质，同时提醒人们要重视甲醛的致癌性，并采取预防措施。②甲醛存放过久 易产生白色沉淀即三聚甲醛，而影响组织标本固定效果；③甲醛容易氧化变成甲酸，使溶液变为酸性，导 致标本酸化，严重时影响细胞核的染色效果；使用甲醛固定的陈旧组织，以多血的脏器如脾和肝等，组织 内易形成甲醛色素，易与含铁血黄素相混淆，使病理诊断受到严重影响；④不能固定肝糖原和尿酸；⑤废 液需特殊处理，不能直接排入管道。废液处理费较高，每千克3040元。⑥目前采