哮喘时细胞因子时间依赖性变化%3a是否IL-13首先触发气道炎症反应%3f.pdfVIP

小鼠哮喘模型中自介素一13上调CD44表达 薛丽姜晓峰★ 哈尔滨医科大学附属第四医院检验科 背景过敏性哮喘是一种慢性炎症性疾病，主要表现为炎症细胞浸润、细胞因子增多和气道高反应性 增强。CD44是细胞表面广泛表达的粘附分子，参与淋巴细胞粘附到炎症内皮。以往研究显示抗原刺激后 肺泡灌洗液中肺嗜酸性粒细胞和CD4+T细胞表达高水平CD44。 目的探讨IL-13能够调节肺组织和外周血淋巴细胞的CD4．4表达，进一步促进炎症细胞聚集到肺部加 重哮喘反应。 方法利用生理盐水和OVA激发小鼠，并于最后一次激发后1小时分别于尾静脉注射小鼠重组Ⅱ，13 和生理盐水进行干预。通过瑞氏．吉姆萨染色计数各组BALF中炎症细胞变化；测定乙酰胆碱刺激后气道反 应性：使用荧光定量PCR和免疫组化方法检测肺组织和外周血淋巴细胞CD44表达情况。 达进一步增高，导致炎症细胞肺浸润增加和气道高反应性增强。 结论1I,-13可以上调肺组织和淋巴细胞的CD44表达，促进炎症细胞的肺浸润进而增加哮喘反应，阻 断CD44表达可以减轻哮喘症状。 哮喘时细胞因子的时间依赖性变化： 是否m．13首先触发气道炎症反应? 薛丽粱红艳姜晓峰★ 哈尔滨医科大学附属第四医院检验科 背景哮喘是一种肺部慢性过敏性炎性疾病，大量研究显示了Th2细胞因子、趋化因子和炎症细胞的 肺浸润在哮喘发生过程中起着重要作用。最近的研究指出1I,-13、趋化因子和炎症细胞的相互协同作用与 哮喘的发病机理相关。 化、AHR和炎症细胞浸润情况，进一步探讨是否1I,-13首先触发炎症反应? 方法利用生理盐水致敏激发作为正常对照组，采用OVA致敏和激发构建哮喘模型；通过ELISA检 肺组织浸润的炎症细胞进行相关性分析；肺组织切片HE染色检测炎症改变。 酸性粒细胞和淋巴细胞计数呈明显正相关。差异具有统计学意义(P0．05或P0．001)。 症反应，干预IL-13的产生将有助于改善哮喘发生。 关键诃哮喘；IL-13：刀L_4；Eotaxin；MCP-1；炎症细胞 哮喘反应以抗原引起IgE、细胞因子、趋化因子产生增加，粘液分泌增高，气道阻塞，嗜酸性细胞增 多，气道高反应性为特征。哮喘时抗原诱导肺部Th2细胞活化导致肺部炎症，水肿，粘液分泌增加，血清 213 性气道疾病模型的研究显示过敏反应期间，气道高反应性，粘液分泌以及抗原诱导的气道炎症均需要Th2 等(3)。 另一方面，大量研究指出趋化因子在哮喘反应中的重要作用。趋化因子作为潜在的白细胞趋化诱导物， 细胞活化因子和组胺释放因子，参与过敏性炎症的发病。近来研究发现趋化因子尤其Eotaxin和MCP-1 在IL-13相关的过敏性肺反应中起重要作用。在哮喘反应阶段诱导明显的趋化因子表达，调节炎症细胞聚 影响因素的因果关系即抗原刺激后何者首先增加诱发气道炎症反应还未被了解。 为了阐明IL-13可以作为哮喘的始动因子，我们研究了诱发哮喘过程中不同时间点Th2细胞因子(Ⅱ4 1材料和方法 1．1动物 雄性6-8周BALb／c小鼠(体重20．229)清洁级，购自哈尔滨医科大学附属第二医院。 1．2抗原激发实验过程 一次。腹腔注射lmlOVA致敏液；于15至29天将小鼠分别放入密闭的有机玻璃染毒罐内。将有机玻璃 箱接雾化吸入器的呼出管，雾化吸入1％卵清蛋白(0VA)溶液，每日一次，每次30分钟，连续激发14 天。空白对照组采用等量生理盐水代替OVA溶液，其余方法相同。 1．3实验分组 分别于致敏第1、3和14天，激发第3、15天和最后一次激发后2天取材。将实验分为：对照组，致 敏第1天组，致敏第3天组，致敏第14天组，激发第3天组，激发第15天组．最后一次激发后2天组。 1．4肺泡灌洗液采集 将麻醉的小鼠充分放血处死，剪开胸腔，分离肺组织，气管插管后分离心肺，结扎左肺门后，分离右 洗，保留30秒后缓慢回吸，重复三次。所得灌洗液经低温离心(1,500 ．80℃保存，待测。加入0．1ml生理盐水溶解沉淀涂片，进行瑞氏．吉姆萨染色进行细胞计数。