γH2AX分析电离辐射诱发小鼠神经元DNA双链断裂及修复.pdfVIP

±堡墼塾匡堂皇堕量盘查!Q塑生!旦茎!!鲞笙!塑垦!堕』垦型丛丛鲤里型：生!墨!翌!Q塑!!些：丝!塑!：1 ·5· 基础研究· 7-H2AX分析电离辐射诱发小鼠神经元DNA 双链断裂及修复 ClaudiaRuebe 董晓荣Ruebe Christian伍钢 【摘要】 目的观察临床剂量的电离辐射后小鼠神经元DNA双链的断裂及修复，探讨T-H2AX 是否能作为衡量体内正常脑组织神经元DNA双链断裂(DSB)形成和修复的指标。方法电离辐射 诱导DSB形成试验，C57BL／6小鼠行0．1、O．5和1．0 Gy全身照射后10mill，收集脑组织进行分析；DSB 修复试验，修复功能正常小鼠(C57BL／6)和修复缺陷鼠(BALB／c，A．T和SCID)在全身照射2Gy后O．5、 2．5、5、24和48 h收集脑组织进行分析。未照射的小鼠作为对照组。7-H2AX和NeuN免疫荧光双重 染色和免疫组织化学染色分析脑组织神经元DSB形成和修复。结果DSB形成试验，在对照组脑 组织皮质区神经元的细胞核内仅有数目很少的7-H2AX焦点，而受照射后细胞核内y-H2AX焦点数 目显著增加，并显示出明显的剂量相关。通过分析不同放射敏感性的小鼠电离辐射后脑组织皮质 区神经元的DSB修复动力学，发现C57BI．／6小鼠细胞核内T-H2AX焦点随时间的延长迅速减少，在 照射后24和48h仅有很低水平DSB未修复；而免疫缺陷SCID鼠在照射后所有的时间点都显示出 T-H2AX焦点的明显增加，A．T小鼠表现出较低的修复缺陷。主要表现在较晚的时间点(≥5h)7-a2AX 焦点的中度增加；放射敏感的BALB／c小鼠与C57BL／6小鼠相比7-H2AX焦点数量轻度增加。结论 7-H2AX焦点分析可以作为一项精确的量化指标，在体内衡量临床相关剂量电离辐射诱导的DSB形 成和修复。 放射敏感性 【关键词】 7-I-12AX；DNA双链断裂； radiation-inducedDNAdouble-strandbreakand assessed loci in Ionizing repair by．r-112AXanalysis i砖uronginmiceDONG Claudia，RuebeChristian，刚G口馏．‘CancerCenter，Union Xiao-rong+，Ruebe Medical Sciellceand of 430022，China Hospital，Ton巧iCollege，HuazhongUniversity Technology，Wuhan author：WU白昭，Email：wugangzr@yahoo．corn．cll Corresponding To if山e foeiisa formation 7一H2AX indexfortheDSB and 【Abstract】0bjectiveinvestigate precise inmatureneuronsofbraininvivoafter relevantdosesirradiation．MethodsFortheDSB repair clinically in formation matureneuronstheneocortexofbraintissueofC57BI．／6micewere at experiment．the