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武汉华中农业大学 2006．10 依普拉芬、大豆黄酮、半胱胺对产蛋性能、骨代谢的影响 中国农业大学林德贵教授大会专题发言 1犬肠道抗菌药物相关性菌群失调的微生物学与组织病理学研究 研究主要通过对动物饲喂固定食物与抗菌药物来建立健康或疾病动物模型，并结合外科手术、微生 物培养鉴定、体外药物敏感性试验、病例分析、组织切片与扫描电子显微镜技术等研究方法，对犬肠道 正常菌群及抗菌药物相关性菌群失调进行系统的研究。主要研究内容包括对犬肠道正常菌群的构成进行 分析；比较动物饲喂营养比例不同的食物所导致的肠道正常菌群差异；引入新型的培养与鉴定方法，探 讨抗菌药物相关性菌群失调动物肠道菌的生长与耐药性动态变化规律；观察分析抗菌药物相关性菌群失 调所导致的动物临床症状与组织病理学损伤。 通过研究发现，犬肠道中有包括需氧、兼性厌氧、厌氧细菌、真菌在内的45个菌属的约最少164 种菌。微生物数量按照肠道由前至后的顺序逐渐增高，十二指肠内容物中微生物数量为102‘77CFU，空肠 内为103一CFU，回肠内为10 57鹪CFU，结肠内为10¨7CFU，直肠内为1010．22CFU。需氧／兼性厌氧菌构成 小肠正常菌群的主体：专性厌氧菌构成大肠正常菌群的主体；真菌仅占肠道正常菌群中的较小部分。高 蛋白、高脂肪、多肉类的食物可以导致犬肠道部分正常菌群改变，涉及菌种包括链球菌、葡萄球菌、棒 状杆菌、埃希菌、双歧杆菌、拟杆菌、乳杆菌、梭菌、念珠菌、青霉菌、地霉菌、毛霉菌与链格孢霉等， 厌氧菌有较明显的增加。相比实验中的商品犬粮而言，常见的家庭自制犬食可能会通过对犬肠道正常菌 群的长期影响而不利于犬的健康。 长期使用克林霉素、头孢噻肟钠、恩诺沙星、阿莫西林、庆大霉素、甲硝唑等抗菌药物会导致犬抗 菌药物相关性菌群失调的出现，并有导致抗菌药物相关性腹泻的可能。犬肠道菌群会随着药物使用期的 延长而出现普遍的耐药性增强。在研究中，犬抗菌药物相关性腹泻的病原菌为产气荚膜梭菌、艰难梭菌、 产酸克雷伯菌、金黄色葡萄球菌与白色念珠菌。其症状主要为腹泻、发热、食欲减退、贫血、自细胞增 多与低蛋白血症等。抗菌药物相关性菌群失调可以导致犬肠道粘膜的组织病理改变，其特征为粘膜上皮 全国兽医外科学第13次学术研讨会小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会论文集 的崩解、坏死、脱落；肠绒毛的水肿、萎缩、断裂；纤维素与粘液的渗出；粘膜充血或出血；假膜的形 成；炎性细胞的大量浸润等，不同病原菌引起的抗菌药物相关性腹泻的肠粘膜损伤模式不同。 犬肠道内的正常菌群，是健康犬正常生长所必需的微生物群体，具有多种生理功能，包括对动物机 体组织结构的影响、对动物营养的影响、对动物免疫功能的影响以及对抗病原微生物的作用等。因此， 深入分析犬肠道菌群的种类构成情况与构成比例，具有重要意义。不同的研究曾在不同的角度证实，常 见的家庭自制犬食品对犬的某些生理机能的健康运转存在着威胁。通过已有的人类或其它动物的研究可 知，食物营养构成中蛋白质、脂肪与碳水化合物的比例改变可以引起动物肠道正常菌群的改变。某些菌 种的高水平生长可能会导致动物罹患消化道恶性疾病的机率增加。由于大多数家庭自制犬食品中营养成 分存在着配比不合理性，因此通过食物营养对犬肠道菌群的影响这--i奂lJ面，试探讨家庭自制犬食品与标 准化犬粮间所造成的肠道正常菌群差异及其对动物健康的影响具有重要意义。 近年来小动物临床中，抗菌药物的应用普遍且频繁，药物应用期一般较长。由于抗菌药物，尤其是 口服吸收不好、高胆汁分泌的抗菌药物会直接对肠道正常菌群造成巨大的影响。严重的会导致抗菌药物 相关性菌群失调，甚至随着失调微生物中病原微生物的大量生长而引发抗菌药物相关性腹泻的出现。因 此，建立动物模型，详尽的研究不同抗菌药物随时问的改变对犬肠道菌群、病原菌的影响以及所可能引 发的疾病与病理改变具有重要的意义。 本次研究结合上述情况，设计了如下几部分实验： 第一部分研究健康犬肠道正常菌群的研究 实验一健康犬肠道正常菌群构成的微生物学分析 实验二比较家庭自制宠物犬食品与标准化犬粮间所造成的肠道正常菌群差异 第二部分研究抗菌药物相关性菌群失调的研究 实验一不同抗菌药物对犬肠道菌群影响的微生物学分析 实验二不同抗菌药物对犬肠道病原菌影响的微生物学分析 实验三不同抗菌药物