新城疫病毒耐热弱毒TS09-C株反向遗传操作系统的建立.pdfVIP

第 53卷第 24期 湖 北农 业科 学 VoI．53No．24 2014年 12月 HubeiAgriculturalSciences Dec．，2014 新城疫病毒耐热弱毒TS09一C株反向遗传 操作系统的建立 温国元 ’，郭 静 ，商 雨 -一，陈 晨 l12，王红琳 ，罗青平 ，张蓉蓉 ，王宏才 ， 张腾飞 ，杨 峻 ，程国富z，邵华斌 (1．湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ，武汉 430064；2．华 中农业大学动物医学院，武汉 430070) 摘要 ：为 了建立新城疫病毒 (NDV)耐热弱毒株 的反向遗传操作平 台．以NDV TS09一C耐热弱毒株为研究 对 象．构建 了TS09一C株 的全长cDNA克隆质粒和 3个分别表达NP、P和 L的辅助质粒。通过4个质粒共 转染预感染有表达T7RNA聚合酶的痘病毒的BHK一21细胞 ．拯救 出了重组病毒 rTS09一C株 生物学特 性试验结果表明，重组病毒rTS09一C株具有与亲本株相似的耐热、弱毒和细胞增殖特性 NDV耐热毒株 反 向遗传操作 系统的建立为耐 热活疫苗载体 的研 究 ．进 一步研发新 型多联 (多价 )耐热禽用 活疫 苗提 供 了技术平 台．也 为耐热机理 的研 究打 下基础 关键词 ：新城疫病毒 (NDV)：耐热；反 向遗传操作 中图分类号：$852．65+9．5 文献标识码 ：A 文章编号：0439—8114(2014)24—6075—04 DOI：10．14088~．cnki．issn0439—8114．2014．24．045 Establishing ReverseGenetic System ofThermostableAvirulentNewcastleDisease Virus Strain TS09-C WEN Guo—yuanI,GUO jingla,SHANG YU一．CHEN Chena,2,WANG Hong-fin~,LUO Qing-pingI,ZHANG Rong-rong． WANG Hong-cai，ZHANG Teng-~i1,YANG Jun，CHENG Guo-fu2,SHAO Hua-bin (1．Institute ofAnimalHusbandryand Veterinary，HubeiAcademy ofAgriculturalScience，Wuhan 430064，China；2．College ofVeterinary Medicine，HuazhongAgricultural University，Wuhan430070，China) Abstract：To establish the reverse genetic system ofthe thermostable avirulentNDV strain TS09-C，the full—length cDNA clone plasmid，along with three supporting plasmidsexpressing the NP，P and L gene，was constructed and CO—transfected into the BHK一21 ceils pre—inoculated with vTF7—3．The recombinantvirusrTS09一C was rescued from BHK一21 cel1．The NDV rTS09——C wasid