猪精子体外获能地研究概况.pdfVIP

首届全国猪育种高峰论坛 论文集 暨联合育种技术与组织模式国际研讨会 猪精子体外获能的研究概况 闫益波，李文刚，申 超 （山西省农业科学院畜牧兽医研究所，太原 030032） 摘 要：精子获能现象的发现大大促进了体外受精技术的发展。近年来，在精子体外获能的研究过程中不断加 深了人们对精子获能机理的认识，同时也不断提高了精子体外获能的效果，进一步推动了体外受精技术的发 展。就当前猪精子体外获能研究概况进行综述，希望能对进一步深入研究有所启示。 关键词：精子；体外获能；效果 生殖生物学通过对生物生殖过程的各个具体环节进行 高 Ca2+ （4.72 mM）和高 pH（pH7.8）的改良的 TCM199 深入的研究，从而阐明生殖的本质，进而可以人工控制生物 培养液（mTCM199）预孵育 4 ～ 5 h 后与体内或体外成熟 的生殖过程，在对动物生殖过程尤其是哺乳动物生殖过程的 的卵母细胞结合，穿透率高达 89%。Yoshida 报道采用改良 研究中，精子获能现象的发现及其机理的研究便是一个很好 的 Tyrode 液（mTALP）能使猪射出的精子获能，在无需 的研究案例。从刚开始对体外受精效率低下的困惑到意识到 预孵育的情况下体外受精并移植后产仔。另外有报道，在精 雌性生殖道孵育的重要性认识，再到体外用其他体液孵育获 子穿透前加 1% 咖啡因，可以延长精子的存活，提高精子的 能，最后到用化学成分明确的培养液获能，这就是一个从现 穿透力。Funahashi 和 Nagai报道，受精液中咖啡因的影响 象到机理认识不断深化的过程，同时也使得人们可以在体外 会引起数量相当多的精子处于自发顶体反应早期，其活力和 实现精子的高效获能。 穿透能力都很强，但是这也可能成为猪 IVF 系统中多精子 1 精子获能现象的发现及其生理机制 穿入卵母细胞的主要原因。现在研究认为，精子体内获能的 动物体外受精的研究尽管早在 1878 年就已经开始，但 机理是：雌性动物生殖道内的获能因子中和精子表面的去能 直到 1951 年由 M.C.Chang 与 Austin 发现哺乳动物的精 因子，并促使精子质膜的胆固醇外流，导致质膜的通透性增 2+ 子的获能现象后才有了突破性进展。之后，体外受精的研究 加，而后，Ca 进入精子内部，激活腺苷酸环化酶，抑制 进展很快，许多动物的体外受精相继成功。现在一般认为， 磷酸二酯酶，诱发 cAMP 浓度的升高，进而导致膜蛋白的 在精卵结合之前，精子必须具备如下能力：1）有能力到达 重新分布，膜的稳定性进一步下降，从而使精子获能最终 卵母细胞并穿过透明带；2）有能力进行获能和顶体反应； 完成，但详细的获能机理还有待于进一步研究阐明。可以说， 3）成熟过程中获得的结合蛋白位点适时暴露给卵母细胞以 任何导致精子被膜蛋白脱除，质膜的稳定性下降，通透性 结合透明带；4）可以与卵母细胞结合并进入到卵质中。精 增加和 Ca2+ 内流的处理方法，都可能诱发精子的获能。 子通过附睾时已获得上述的大部分能力，但精子必须在雌性 2 影响精子体外获能效果的因素 生殖道或体外培养液中停留一段时间获能以后才具备受精 2.1 动物的种类 能力。随着对获能现象的研究不断深入，精子由最初的在同 动物精子的获能因动物种类的不同而表现出较大的差 种或异种雌性生殖道内孵育获能发展到用子宫液、卵泡液、 异，有些动物的精子不需要添加特别的成份，在基本的平 子宫内膜提取液或血清等