广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒的限制性片段长度多态性分析.pdfVIP

ChineseJournalofVeterinaryMedicine 中国兽医杂志 2008年(第44卷)第 11期 13 广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒的 限制性片段长度多态性分析 周丽萍 ，罗满林 ，刘镇 明，贺东生 (华南农业大学兽医学院传染病教研室 ，广东 广州 510642) 中图分类号：$852．65 文献标识码 ：B 文章编号：0529—6005(2008)110013—03 猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)属动脉炎 传分析。文献显示 ，PRRSV存在两种不同的基 因 病毒科动脉炎病毒属成 员，包含 7个开放 阅读框 型，而 N基因在每个基因型中都是相当保守的，然 (oRFs)，目前有两个血清型，即欧洲型和美洲型，而 而，PRRSV的如要囊膜蛋白(GP5)却显示 了很大的 美洲型毒株又可分为多个亚型_】]。其 中0RFla和 变异性。根据全序列基 因所做的系统进化树和 N ORF1b编码病毒的多聚酶 ，oRFs2—6编码膜蛋 白， 蛋 白相 比也显示了较大的基因变异性。利用 RFLP ORF7编码病毒的非糖基化核衣壳蛋 白。在所有结 分析对 PRRSV分离株和疫苗株进行区分，可用于 构蛋白中，GP5被认为是最重要的结构蛋 白。GP5 对暴发PRRS猪场的疫病诊断、毒株与疫苗毒亲缘 或GP5编码的M 同源蛋白被认为介导 了病毒进入 关系研究及 PRRSV分离毒株遗传变异的研究 。不 和吸附到靶细胞。除此之外 ，GP5的中和性抗原决 同PRRSV分离株间存在毒力、基 因序列和抗原性 定簇位于其胞外 区的中间区域。早期的研究表 明， 等方面存在较大的差异_4]。本试验通过RFLP技术 ORF5是 PRRSV基 因组 中功能变异最大 的一个 区 分析广东地区PRRS的RFLP基因分型研究 ，丰富 域 ，其异源性不仅发生在美洲株，欧洲株也证实 了其 了我国PRRSV 的分子流行病学文献及其遗传进 较大的变异l2J。ORF5的遗传多样性与 RNA病毒 化，为防制PRRS的提供参考 。 的RNA多聚酶的变异是一致 的_3j，且病毒 的选择 1 材料与方法 性压力使病毒更能在宿主细胞中扩散 。 1．1 PRRS病料 2006年 3月至 2007年 3月从广 限制性片段长度多态性 (Restrictionfragment 东各地区猪场收集到的疑似 PRRS的材料如肺脏 、 lengthpolymorphism，RFLP)常用于生物群体 的遗 淋 巴结、大脑等共 6O份 。取 1．0～2．0g于无菌的 匀浆器中研磨并用 Hanks(pH7．2～7．4)稀释成 1：3 收稿 日期 乳剂，反复冻融 3次后 8000r／rain离心 10min，取 基金项 目：广东省科 技计划 (2007A020300006—4)，教育部创 新 上清于一20℃保存备用。 团队(IRT0723) 1．2 分子生物学常用试剂 反转 录酶 (ReverTra— 作者简介：周丽 萍 (1980)，女 ，硕士生，研 究方 向是兽 医传 染 nAce)、RNA酶抑制剂 (Rnasin)为 T0YOBO公司 病学 通讯作者：贺东生 ，电话 ：02085280243；Email：dhe@scau．edu． 产 品。 ExTaqDNA聚合酶、rTaq、dNTPS、DNAMarker 的浓度值 ，所以我们推测 ，黄芩苷对细菌感染性疾 参考文献： 病 的治疗作用可能并不是通过直接的抑菌作