杨凌某羊场羊口疮病毒的分离鉴定.pdfVIP

动物医学进展 ，2015，36(1)：61—65 ProgressinVeterinaryM edicine 杨凌某羊场羊口疮病毒的分离鉴定 张 瑜，高晶晖，张立强，高 洋，贾云晓，陈德坤 (iN北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 712100) 摘 要：为获得杨凌地区羊口疮病毒野毒株，在某羊场采集具有典型羊 口疮症状的病羊口唇部结痂并研 磨，无菌过滤后取 500 L接种于犊牛睾丸原代细胞 。盲传4代 ，测定细胞病变的第5代病毒的滴度 ，用羊口 疮病毒 B2L和 FIL基 因的特异性 引物进行 PCR检测。结果显示，第 5代病毒能够致犊牛睾丸原代细胞 出 现细胞病变(CPE)，病毒滴度为 10瞄·TCID。／mL；扩增出了羊 口疮病毒B2L和 FIL基因的片段，其大小分 别为540bp和 437bp，与用于设计引物的参考毒株序列的相似度分别为 96．57％和96．43 ，可确定为羊 口 疮病毒的相应基 因片段 ，获得 了羊口疮病毒分离株。 关键词 ：羊 口疮病毒 ；PCR检测；犊牛睾丸原代细胞 ；分离；鉴定 中图分类号 ：$852．65 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007-5038(2015)01—0061—05 羊 口疮(Off)又叫羊接触传染性脓疱皮炎 (Con— 中分布较为广泛 ，对养羊业造成较大的威胁_|3]。在 tagiouspustulardermatitis)，是 由羊 口疮病毒 (Orf 我 国青海 、宁夏、新疆 、陕西、吉林、四川、黑龙江、西 virus，ORFV)引起的一种接触性传染病。病毒主要 藏和甘肃等地都有羊 口疮流行 的相关报道 ，给养羊 感染绵羊和山羊，山羊 比绵羊易感 ，羔羊 比青年羊更 业造成了较大的损失_4]。文献报道[7]，近年来羊 口 易感 ，羊感染后 口唇部产生增生性损伤[1]。3月龄 疮病毒分离株出现了基 因变异 ，这些变异是否会导 ～ 6月龄的羔羊发病率一般为95．4 左右 ，致死率 致我国羊 口疮弱毒疫苗免疫保护效果下降，还存 一 般在 O～93 之 间 ]。羊 口疮在世界各养羊 国家 在一些争议 。因此 ，有必要对我 国各地羊 口疮野毒 收稿 日期 ：2014—04—15 基金项 目：陕西省科技统筹创新工程计划项 目 (2013KTZB02—02—02) 作者简介：张 瑜 (1989一)，女，陕西宝鸡人，硕士研究生，主要从事生物制品与免疫技术研究。*通讯作者 [13] 徐丽娟，权可艳 ，王 浩，等．恩诺沙星控制嗜水气单胞菌性鲫 fromgrasscarpandChinesetigerfrog[J]．JMedMicrobiol， 败血症的防耐药用药方案EJ]．中国水产科学，2013，2O(3)： 2O13，62(10)：1559-1564． 635-643． [15] FangX，LiuX，LiuW，eta1．Pharmacokineticsofenrofloxa— [143 ChenDQ，YangL，LuoY T，eta1．Prevalenceandchflrac- einin allogyn0geneticsilvercrueian carp，Carassiusauratus terizationofquinoloneresistanceinLaribacterh0ngk0ngensis Gibelio[J]．JVetPharmaeolTherap，2012，35(4)：397—401． POstantibi0ticEffectsofEnrofloxacin inVitro AgainstAeromonassobria LILi，CAO Yan—chao，XIE Xu—yang，CHEN Ying，DAIW en—ting，KONG Xiang—hui (CollegeofFisheries，HenanNormalUniversity，Xinxiang，Hen