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第一章 临床检验实验教学 临床检验相关重点知识的内容请参阅本次培训班的课件、教材、《全国临床检验操作规程》第3版、冯仁丰《临床检验质量管理技术基础》等。 教学方式：示教、操作、提问、讲解等。 学时：总学时90-120分钟，血常规、凝血、体液各30分钟。 第一节 血常规检验 第一部分 检验流程及相关重点知识 一、分析前 （一）标本采集、验收 血常规标本采集注意事项。（见《全国临床检验操作规程》第3版P121-122页） 标本验收的注意事项：标本采集时间、病人信息是否完整、标本是否合格（有无凝块、溶血、量不足等） 建立标本采集指南 供全院医务人员、检验医师、检验技师、护工、受检者等使用。 二、分析中 （一）血细胞分析仪的使用、校准、保养、维护。 1、建立血细胞分析仪操作SOP文件。使用试剂应与仪器配套，非配套试剂应严格进行试剂与仪器性能验证，所有指标合格方可使用。 2、血细胞分析仪的校准（每台仪器都应校准、每年2次，校准报告备查）。 3、 在以下几种情况需对仪器进行校准 （1） 血液分析仪在投人使用前； （2）更换部件进行维修后，可能对检测结果的准确性有影响时； （3） 室内质量控制显示系统的检测结果有漂移时(排除仪器故障和试剂的影响因素后)； （4） 对于开展常规检测的实验室，要求半年至少进行一次校准。 4、 仪器校准时用户应关注的问题 仪器由公司负责校准用户在验收时应关注： （1）校准物 对于使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室，可使用制造商规定的配套校准物，也可使用新鲜血作为校准物。对于使用无配套校准物检测系统的实验室，必须使用新鲜血进行仪器校准。 （2）校准结果的确认 校准物检测结果的均值，须在定值的允许范围内，如达不到要求，须请维修人员进行检修后重新校准。 （3）本室质控品的确认 用本室不同水平的质控品进行测定，结果须在提供的允许范围内。 5、掌握对血细胞分析仪的正确保养和维护，并作维护记录。 （二）室内质控 1、质控品的选择：选择仪器配套的质控品或第三方质控品，结果稳定，包括高、中、低三个浓度，至少包括两个浓度。 2、质控频次：每24h至少一次。必须在病人标本检测前测定。 3、质控物使用要点：、 （1）靶值确定：在仪器运行状态稳定的前提下，采取累积法（5天、10天、20天），计算均值为暂定靶值，（靶值应落在厂商提供的范围内）下月计算累积均值为靶值。 （2）质控规范（目标）：日间变异SD确定后一般不变。 项目 基于CLIA88’设立的总误差 基于生物学变异设立的总误差% 总 1/3 1/4 期望的 最佳的 最低的 红细胞 6 2.0 1.50 4.4 2.2 6.5 血细胞比容 6 2.0 1.50 4.1 2.0 6.1 血红蛋白 7 2.33 1.75 4.1 2.1 6.2 红细胞平均体积 7 2.33 1.75 2.3 1.2 3.5 红细胞平均血红蛋白浓度 7 2.33 1.75 2.2 1.1 3.3 红细胞平均血红蛋白量 7 2.33 1.75 2.7 1.3 4.0 白细胞 15 5.0 3.75 14.6 7.3 21.9 血小板 25 8.33 6.25 13.4 6.7 20.2 （3）质控规则：多规则方法-Westgard规则，可根据自己实验室状况选择。 （4）质控图：L-J质控图（X-SD质控图），以x±2s为警告限，以x±3s为控制限。 （5）影响因素：环境、仪器状态及质量、试剂质量、质控品质量、操作技术等。 4、失控处理：见《全国临床检验操作规程》第3版P91-94页。 三、分析后 （一）检验结果审核 1、掌握血细胞分析仪正常和异常散点图、直方图分布特点 （1）血细胞直方图是根据库尔特原理测量通过感应区的每个细胞脉冲，并累积进行分析测量计数，得到的体积大小分布图，横坐标为体积大小，纵坐标为相对数量.红细胞直方图呈正态分布；血小板直方图呈正偏态分布；白细胞直方图呈3个峰态曲线图，并按3个峰下面积对白细胞分群（小、中、大细胞）。 1）红细胞直方图：是仪器在35～250fl的范围内分析红细胞。红细胞直方图的显示范围为25～250fl,25～35fl用于监测是否有小红细胞或干扰物质存在。正常红细胞主要分布在50～150fl范围内，峰顶在82-96fl。从红细胞直方图上看好似两侧对称的正态分布曲线。应注意不同型号的仪器，红细胞分析范围不完全一致，直方图曲线的特点也有差异。 2）血小板直方图：是仪器在2～30fl的范围内分析血小板。正常血小板体积2-5μm，所以最高峰偏左。 3）白细胞直方图：是仪器在30～450fl的范围内分析白细胞。小细胞（淋巴细胞）偏左，大细胞（中性粒细胞）偏右。 2、血细胞散点图分析原理及分布特点 （1）D