绿色环保型病理制片技术的探讨.pdfVIP

绿色环保型病理制片技术的探讨 席越 (北京积水潭医院病理科) 目前，我们技术领域面临的是一个很恶劣的工作环境，虽然大部分的实验室都采取了一定的措施，改 善通风环境，但是只要我们仍在使用那些有毒试剂(甲醛、二甲苯等)，毒害就不会停止，而目前的情况 并不乐观，即使是大型的三甲医院，也仍还有很多实验室在使用这些有毒化学试剂，我们认为在今天这个 非常重视环境及身体健康的社会，在各种高科技产品不断问世的年代，我们完全可以摆脱受毒害的状况， 成功的采用了绿色环保型的制片程序，解决了有毒化学药品对工作人员的毒害问题，而这一制片程序的效 果不但很好，而且在某些方面还超出了我们以前制片程序的效果，在这里我们愿与广大病理技术同仁共同 探讨和分享我们的新方法，以对改变我们的工作环境及身心健康起到抛砖引玉的作用。 材料与方法。 一、材料 1．2004年．2011年全部病理活检标本30000例 2．环保型病理制片程序中的有毒化学品的替代物 (1)甲醛替代物：FineFIX 苯替代物)、UTC切片透明剂。 (3)超净封片胶(U仃aI【in) 二、方法 制片全程使用，从而使整个病理制片过程彻底剔除甲醛、二甲苯的使用，真正’jjI地病理制片过程的无毒作 业，从而真正建立起了一个绿色环保型的病理制片实验室。 甲苯用于自动脱水机的组织透明；WaxOut主要替代二甲苯用于自动脱水机的试剂槽清洗；C．D新型脱蜡 胶使用。 脱水机绿色环保脱水程序 自动染色机绿色环保染色程序 应用。 经过多年的实际应用，我们在完全用甲醛、二甲苯替代品应用于以上程序后，取得了十分理想的制片 效果，从而证明以上替代物完全町以取代甲醛、二甲苯而成为病理组织制片的理想试剂，相对于甲醛、二 239 甲苯不仅处理效果完美，更可以使我们的病理工作人员完全摆脱甲醛、二甲苯的毒害，使我们的工作环境 真正达到绿色标准。 一、FineFIX环保型固定剂的应用： 1．FineFIX是一种不含福尔马林的水溶性浓缩液，用乙醇稀释后的配方已获专利，并克服了以往纯酒 精固定液或乙醇类固定液所存在的明显的组织收缩、细胞空泡以及核固缩等缺陷，FineFIX能够相对有效 地保存组织抗原、维护良好的细胞核和胞浆形态学结构，同时能保护细胞膜的完整性。FineFIX处理组织 时间短，因其在固定过程中就较早开始脱水及去脂；它非常适用于后固定，快速去除含脂较多组织中的脂 肪，经FineFIX处理后的组织，在形态学上可保证很高的质量，不会因切片质量而影响诊断，与传统的甲 完全可以适用于病理诊断所需的常规HE染色、免疫组化标记及组织化学染色及特殊染色；采用FineFIX 固定可使DNA及RNA得到极佳的保存，有利于展开分子生物学研究。 2．FineFIX无毒性，其在空气中的弥散值远远大于甲醛，由于其在空气中的弥散率低，故更加突出了 FineFIX在维护实验室人员身体健康的优越性。 3．FineFIX环保处理 不需甲醛中和剂进行废液处理，回收容易；以乙醇成分为主的FineFIX，可依据乙醇废液处理程序处 会凝结)。 4．FineFIX固定剂在免疫组化中的应用 修复抗原决定簇(Epitope 的处理流程极不规范，其主要原因是：福尔马林交联反应持续存在，组织在固定液中停留时间较长，因此 免疫组化标记的敏感性与染色强度参差不齐也就在所难免了。 FineFIX进行固定属于自然沉淀模式，组织抗原特性不受影响，避免了因固定剂交联作用而产生的抗 原数量上的衰减，因此，在进行修复抗原时，不必采取有破坏性的修复方法，从而使抗原修复技术更为标 准化，FineFIX这种无交联反应的优势，提高了抗原对抗体的敏感性，因此在许多情况下，这种节约抗体 的作用尤为明显，可以稀释抗体而减少抗体的用量，这样，对使用多克隆抗体的用户，一定分量的试剂在 原有基础上增加了检测的例数。 针对FineFIX固定、石蜡包埋组织的抗原修复流程应采用如下规则 ①抗原修复温度低，一般不超过85℃。 ②抗体稀释度高，一般在1：200左右。 ③