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实验动物与药理学,毒理学研究学术交流会
GFP和Luc双标技术在小鼠肿瘤模型建立中的应用
王晓敏1,闰明霞1,梁琳慧1,李金枝2,朱淼鑫1
孔韩卫1,赵方瑜1,吴一迁1,姚明1
1.上海市肿瘤研究所, 上海2000322.复旦大学附属金山医院,上海200540
fluorescent
【摘要l目的建立GFP(Green
胞系,利用活体成像系统观察裸小鼠肺原位移植瘤和肝原位移植瘤的生长情况。方法应用慢病毒转染的方法建立
种于裸小鼠肺原位和肝原位,采用活体成像技术监测各稳定转染细胞在小鼠体内深部组织的表达情况。结果成功建
肝原位移植后,应用活体成像系统观测到裸小鼠肺原位和肝原位早期的微小病灶和晚期移植瘤的生长情况,而且,
随着肿瘤移植时间的延长,移植瘤体积的增大,活体成像检测到的发光面积逐渐增大,发光强度也逐渐增加。结论稳
定表达GFP/Luc的细胞系,结合活体成像技术,能够对动物模型深部的肿瘤病灶进行活体、实时、定量检测,且灵
敏度极高,为进一步研究肿瘤的发生及发展提供了理想的技术手段。
【关键词】GFP/Luc双标,慢病毒载体,活体成像系统,裸小鼠,肿瘤模型
OfThe OfGFP/Luc InModelOf
ApplicationTechnique Double-tagging
MouseTumour
to celllineandhuman
[Abstract]Obieetiveestablishhumancancer liverc卸肼celllinewithGFP/Luc
lung
rate to the in of
whose are observe oftumorsthe
double-taggingexpressingnearly100%,and development de印organisms
nudemicewithin vivobiofluorescenceMethodsestablishSPC.A.1.GFP/Lcucelllineand
imaging.
SMMC.7721.GFP/Lcueellline lentivirustransfection,b既lhancetheirGFP/Luc ratetoabout
by double-taggingexpressing
1 00%bvflow wereinoculatedinthe andtheliverofnudemice the
eytometer,then lung
eell RllnOUrsinthenudemiceinvivo
behaviorsofthetwo linesuansfectedinthe of biofluorescence
stably development by
Resultshavebuilt thecelllinesofSPC-A-1.GFP/LCUandSMMC一7721.GFP/LcuwithGFP/Luc
imaging. up
rate 100%.Afterthetwocelllineshavebeeninoculatedinthe andliverofnude
double.taggingexpressingofnearly lung
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