蚊耐氯菊酯C636细胞构建及耐药相关基因PR—XPl的表达分析.pdfVIP

第 11期 (总第371期) 农产品加工 No．1l 2014年 11月 Farm ProductsProcessing NOV． 文章编号：1671—9646 (2014)1lb一0054—04 蚊耐氯菊酯 C6／36细胞构建及 耐药相关基因PR—XP1的表达分析 刘娜女 ，段晓雷，赵 飞， 刘虎岐 (西北农林科技大学 生命科学学院，陕西杨凌 712100) 摘要：建立蚊耐氯菊酯C6／36细胞，并探讨PR—XP1基因与蚊C63／6细胞对氯菊酯的耐药性之间关系。采用逐步诱导 法筛选蚊耐氯菊酯C6／36细胞，观察耐药细胞形态变化 、生长状态，测定生长曲线和半数致死剂量；利用荧光实时定 量PCR鉴定PR—XP1基因在敏感细胞与耐药细胞中的表达差异。获得耐400I~g／mL氯菊酯的C6／36细胞；实时定量 PCR检测发现抗药基因PR—XPI在蚊耐氯菊酯C6／36细胞中表达量明显上升。表明构建蚊耐氯菊酯C6／36细胞是研究 蚊虫氯菊酯耐药性的有效方法，初步证明PR-XP1基因表达升高可能与蚊虫对氯菊酯的耐药性具有一定的相关 。 关键词 ：C63／6细胞；氯菊酯；蚊虫耐药性 ；逐步诱导法；PR—XP1基因 中图分类号 ：Q78 文献标志码：A doi：10．3969j／issn．167t一9646(X)．2014．11．047 EstablishmentofC6／36Permethrin-resistanceCellMosquitoand AnalysisofPR—．XPIGeneExpression LIUNa-nv，DUAN Xiao-lei，ZHAOFei，LIU Hu-qi (CoRegeofLifeScience，NorthwestAgricultureandForestryUniversity，Yangling，Shaanxi712100，China) Abstract：Theaim ofthisexperimentistostudythemolecularmechanism ofpermethfin-resistancecellmosquitohtroughes- tablishingC6／36permethrin—resistancecelllineandanalyzingPR—XP1gencexpressionchange．Stepwisescreeningisusedto establishC6／36permethrin—resisatncecellline．GrowthcurveassayandMTrmethodareusedtoobservethephenotypeand growthfeaturesofC6／36permethrin-resisatneecellline．Real-timePCR isimpliedtoanalyzethePR-XP1genemRNA level withspecificprimes．TheC6／36permethrin-resisatncecelllineareestablishedwhichisagainstupto400p~g／mLpermethrin． Theresultsofreal-timePCR show thePR-XP1genesignfiicnatlyincreasesinC6／36permehtrin-resistancecellline．Itshows thathteestablishedC6／36permehtrin-resistancecelllineisan effectivecell modeltostudyhtemechanism ofpermethrin- resistanceinmosquito．Itispreliminarilyprovedthattheup—regulatio