鸭源新城疫病毒病RT-PCR诊断方法的建立应用.pdfVIP

鸭源新城疫病毒病 RT—PCR诊断方法的建立与应用 李建侠．习有祥‘．刘 霞．李宏梅 (山东农业大学动物科技学院，山东泰安271018) 摘要：【目的】建立鸭源新城疫病毒病快速、准确检测的方法。【方法】设计一对引物 扩增鸭源新城疫病毒融合蛋白(F)基因的727 bp的特异性片段，并进行了特异性试验和敏 感性试验，建立鸭源新城疫病毒病的RT．PCR诊断方法。应用建立的RT-PCR诊断方法对山 东不同地区分离的20株疑似鸭源新城疫病毒毒株和150份疑似新城疫病毒病鸭的感染病变 组织进行了检测。【结果】特异性试验表明，该方法能够从鸭源新城疫病毒SDFCH株扩增 到727 bp的特异性片段，而鸭瘟病毒、H9N2亚型禽流感病毒、鸭肝炎病毒扩增结果为阴性； 敏感性实验表明，该法最低检出量的cDNA浓度为3 p∥此；山东不同地区20株疑似鸭源新 城疫病毒分离株中有15份为阳性；150份疑似新城疫病毒病鸭的感染病变组织有125例为 阳性。【结论】建立了RT．PCR诊断方法，该方法快速