流式细胞术检测成人急性白血病免疫表型特点分析.pdfVIP

维普资讯 新疆医学2008年第38卷 流式细胞术检测成人急性 白血病免疫表型特点分析 新疆医科大学第一附属医院血液3 ； ： 黧 摘 要 目的：1．探讨免疫分型对成人急性 白血病(AL)的诊断价值；2．分析成人急性 白血病 免疫表型特点及免疫亚型分布情况。方法：采用流式细胞仪结合单克隆抗体双色直接免疫荧光标 记方法检测75例急性白血病免疫表型；用瑞 氏染色及细胞化学判断骨髓形态学结果。结果：1．75 例AL中6例形态学与免疫分型不相符 占8％。2．ANLL主要表达 CyMPO和 CD33，ALL主要表达 CD79a、CD20。3．AML组中CyMPO阳性表达率远高于ALL组，差异显著 (P0．01)，CDII7在 Ly 一 AML组中阳性表达率远高于Ly一一AML组(e0．01)。结论：1．白血病免疫分型是对形态学分 型的补充和修正，对于B—ALL、T—ALL、Mo及 HAL诊断必可少。2．MPO是髓系特异标志，CDll7 与 Ly 一AML发生密切相关。 关键词 急性 白血病；免疫分型 ；流式细胞仪 传统的依靠形态学和细胞酶学的急性 白血病 LL1例 。 FAB诊断标准具有主观性强、重复性差的缺点，其诊 二、试剂与仪器单克隆抗体：T细胞系为 CD2、 断准确率仅为60～80％L1J，近年来发展的流式细胞 CD3、CD7，B细胞 系为 CD10、CD19、CD20、CD22、 仪 (Flowlytometre，FCM)能多参数、快速、定性地检测 CD79a，髓细胞系为 CD13、CD14、CD33、CD41，非系列 AL细胞单克隆抗体表达，弥补了此项缺点，使诊断准 特异性单抗有 CD34、CD38、HLA—DR，所有单抗均为 确率提高到90％以上 J。为了克服以往 FCM单参 FITC直标单抗，购 自BECKEMAN公司，流式细胞仪 数免疫标志测定易将正常细胞包括在 内从而影响结 型号为 COULTEREPICSALTRA。 果分析的不足，我们采用以CIM5和侧向角散射 (side 三、方法：采用直接免疫荧光标记法及流式细胞 effect，ssc)双参数散点图设门，应用双色荧光标记 术：取乙二胺四醋酸二钾／三钾盐 (EDTA—K)抗凝 FCM技术检测 75例 AL患者免疫分型表达，并与 骨髓2ml，用红细胞裂解液破坏红细胞，再用 PBS洗 FAB诊断对比分析，结果如下： 涤、悬浮、记数，加单抗后，室温避光孵育3O分钟， PBS洗涤后上流式细胞仪检测，结果判断：MPO≥ 资 料 与 方 法 5％，其它标志／20％为阳性。 一 、一 般资料：75例急性 白血病 (AL)均为我院 四、统计学方法：x检验 2005年 1月一2007年 1月初诊患者．男41例，女34 结 果 例，平均年龄39岁。根据 FAB形态学分型标准，急性 淋巴细胞白血病(ALL)9例；急性髓细胞白血病 (AN— 一 、 FAB分型与免疫分型诊断比较 LL)63例，其中M55例，M35例M53例，有3例形态 所检测 75例 AL患者中，FAB分型与免疫分型 学及细胞化学难以确诊，拟诊为ALLl例，Mol例，AN— 不符6例(占8％)，其中ALL2例 (占2．67％)，AN— 维普资讯 ， LL4例(占5．33％)。 (62．30％)，CDll(39．34％)，CDI3(36．07％)，CD56 二、AL抗原表达情况 (27．87％)，CD117(16．39％)，CD15(14．