胡辛麻镇痛软膏中延胡索乙素提取方法的优化研究.docVIP

胡辛麻镇痛软膏中延胡素提取方法的优化研究 季锡中，韩关绥，方志军 （江苏省中医药研究院，江苏 南京 210028） 摘要：目的 探索优化延胡素的提取方法。方法 在原有临床研究及制剂预试的基础上，对原药材的关键技术条件及基质处方进行优选。结果 初步建立了可行、稳定的制备工艺流程，以及制备工艺流程关键步骤的质量控制方法、成品质量控制标准。结论 该工艺条件下制备出安全、有效、稳定的中药镇痛霜剂。 关键词：延胡索乙素，渗漉，软膏剂，提取工艺 中图分类号：R927 文献标识码：A 文章编号：1673-6427（2012）06-0039-03 胡辛麻镇痛软膏为我院已故外科专家，林祖庚主任医师根据多年临床经验，设计的科研处方。主药由祖师麻、延胡索、细辛组成，制成O/W型软膏剂。 根据原药材所含主要活性成分理化特性及立题前预试，拟将祖师麻用乙醇提取，延胡索用酸性乙醇提取，细辛提挥发油及水提醇沉其余部分。 本实验针对延胡索的单独提取工艺，利用正交法，做工艺技术条件的优选。 1 仪器与材料 1.1 仪器与试剂 Wters HPLC仪，510泵，996型二极管阵列式检测器，Millenuium 2010色谱管理系统；CQX25-06超声清洗器，上海必能信超声有限公司；B-490(水浴) BüCHI；对照品延胡索乙素（dl-tetrahydropalmatine） 购自中国药品生物制品检定所；试剂均为AR（上海化试厂）。 1.2 药材 市售合格药材、经南京中医药大学吴德康教授鉴定，系罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W. T. Wang的干燥块茎。 2 方法与结果 2.1试验方案的设计：经预试，选用提取方法，溶媒浓度，溶媒酸度及饮片粒度为考察因素见表1 ，作L8（27）正交优选，考察指标选用具镇痛活性的延胡索乙素[1]及总提取物量，各试验号平行操作。 2.2 含量测定方法 2.2.1色谱条件 色谱柱μ-bondpak TMC18(?3.9×300mm);流动相：甲醇-水-醋酸（76：24：2），10%NH4OH 溶液调PH至4.6；流速0.5ml/min；检测波长为280nm；柱温：室温。 2.2.2对照品溶液的制备及线性关系的初步考察，精密称定对照品1.750mg，无 水乙醇溶解，定容至1ml，为对照品溶液。精密吸取对照品溶液，2、6、10、14、18μl按上述色谱条件测定峰面积见表1。计算得回归方程：Y = 1620331X – 10882，r = 0.9998。表明延胡索乙素在3.5 - 31.5μg范围内有良好线性关系。 作者简介：季锡中（1962 - ），男，汉族，江苏·宜兴，副研究员，医学学士，从事中药制药工程研究。Tel：（025 E-mail:xljn66@ 2.2.3供试品溶液的制备 取相应粒度延胡索30g，ml。按序编号，备用。 表1 线性考察数据 进样量（ul） 2 6 10 14 18 峰 面 积 表2 因素、水平表 因素 A B C D 水平 提取方法 醇浓度（%） PH 粒 度（目） 1 回流 （8倍1h，6倍0.75h） 50 4 20 2 渗漉 （10倍媒，流速1ml/min） 70 6 40 2.2.4测定方法 延胡索乙素含量值测定 吸取供试品溶液5ml，挥尽乙醇，10ml水溶解，30%Ca(OH)2调PH至11，乙醚萃放3次（20，20，15ml）合并醚液，回收、挥尽乙醚，残渣以无水乙醇溶解，过滤，定容至5ml，005版一部附录HPLC法相关要素测定[2]，每次进样20μl，计算含量见表3。 表3延胡索乙素含量测定结果 试验号 1 2 3 4 5 6 7 8 含量（mg） 4.02 4.05 5.46 4.51 4.46 3.74 4.76 3.77 固型