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微生物的分离培养与计数.ppt
学习目标: 可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物分离、微生物培养与计数等实际问题。 一、微生物的分离 (课本15-16页) 1.找出微生物分离的原理? 2.根据我们所学的培养基种类,你认为分离的时候一般使用的是什么培养基? 3.对微生物进行分类、鉴定的重要依据? 4.常用的分离方法? 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、PH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 固体培养基、选择培养基 菌落的形态特征 还可以利用电子显微镜观察细菌和支原体等的结构特征 平板分离法 二.微生物的培养 在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。 培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌:30~37℃培养1~2d 放线菌:25~28℃培养5~7d 霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。 实例:分离土壤中能分解尿素的微生物 1、在该配方中,为微生物生长提供碳源和氮源的是什么物质? 2、绝大多数的微生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,请分析该培养基是否对微生物有选择作用?如果有,是如何进行选择的? 葡萄糖、尿素 读课本17页表1-2:思考以下问题: 培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分 解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能 分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制, 所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 三、微生物的计数课本18页 1.微生物计数的常用方法? 2.平板计数为何计算的是菌落,这样计算的数值和实际比起来是偏大还是偏小,为什么? 稀释涂布平板法、显微镜直接计数法, 还可以用过滤膜法 稀释涂布平板法(也叫活菌计数法) 原理:当样品的稀释度足够高时,培养基面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 统计的菌落往往比活菌的实际数目低。 注意事项 ①为了保证结果准确,一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。 ②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中,经涂布,培养计算出菌落平均数。 ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。 ④涂布平板法所选择的稀释度很重要,一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。 1.使用选择培养基的目的是( ) A.培养细菌 B.培养真菌 C.使需要的微生物大量繁殖 D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别 2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( ) A.CO2和N2 B.葡萄糖和NH3 C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素 当堂训练 C D * 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 * 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容
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