MicroRNA与基因的调控.docVIP

MicroRNA microRNA（miRNA）其在细胞内具有多种重要的调节作用。RNA主要通过与其靶基因mRNA的3’-UTR端互补结合降解mRNA或是抑制mRNA的翻译从而阻遏基因的表达MicroRNA的特点 （1）广泛存在于真核生物中, 是一组不编码蛋白质的短序列RNA , 它本身不具有开放阅读框架(ORF) ;通常的长度为20～24 nt , 但在3′端可以有1～2 个碱基的长度变化;成熟的miRNA 5′端有一磷酸基团, 3′端为羟基, 这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA 的降解片段区别开来；多数miRNA 还具有高度保守性、时序性和组织特异性。Argonaute蛋白家族成员eIF2C2因子,后两种蛋白质与运动神经元的存活(survival of motor neurons,SMN)有关。研究认为，miRNP即为RISC. miRNA与靶mRNA作用的典型方式主要有两种： 在大多数情况下(例如在动物中)，复合物中的单链miRNA 与靶mRNA的3 UTR不完全互补配对，阻断该基因的翻译过程，从而调节基因表达。这种方式只影响蛋白表达水平，并不影响mRNA的稳定性。目前，该翻译抑制的详细机理尚不清楚。最近有研究对此提出质疑，他们认为，正常衰退途径引起的mRNA降解速度的升高也会导致蛋白质表达水平的下降，且miRNA不仅能作用于翻译起始后的延长阶段，还能够抑制翻译的起始。被抑制的靶mRNAs和miRNAs共同聚集于胞浆中被称为P-bodies的区域，这个区域还浓缩了许多参与mRNA降解的酶类。然而，P-bodies可能是作为未翻译mRNA进行暂时的可逆储存的容器，并且，减少一些特定P-body组成蛋白的表达能够缓和miRNA介导的基因表达抑制。 P bodies是胞浆中的一定区域，它包含参与多种转录后过程的蛋白质，例如：mRNA降解(mRNA degradation)、无义介导mRNA衰退(nonsense-mediated mRNA decay ,NMD)，转录抑制及RNA介导的基因沉默(RNA-mediated gene silencing)。尽管P bodies不是介导基因沉默所必需的，但阻断siRNA或miRNA基因沉默途径的任何一步都会阻碍P-body的形成，这表明P-body是基因沉默的结果。因此，尽管P-body成分在mRNA沉默及衰退中起重要作用，但P-body中的这种聚集并不是介导基因沉默机制所必需的，而只能作为他们活动的结果。 另一种作用方式是，当miRNA与mRNA完全互补配对时，引起目的mRNA在互补区的特异性断裂，从而导致基因沉默，这种作用方式与 siRNA类似。如大多数植物在可读框(ORF)中与它的靶位点几乎完全配对。这种mi/siRNA介导的基因沉默机制已得到了相关的阐释。以siRNA参与的RNAi为例进行说明，siRNA可与RISC结合,作为模板识别mRNA靶子，通过碱基互补配对原则，mRNA与siRNA中的反义链结合，置换出正义链。双链mRNA在Dicer酶、ATP和解旋酶共同作用下产生22nt左右的siRNA，siRNA继续同RISC形成复合体，与siRNA互补的mRNA结合，使mRNA被RNA酶裂解。这个过程也称为转录后基因沉默(PTGS)。 miRNA以何种方式与目的基因作用和miRNA与目的基因的配对程度有关。MiRNA与目的基因配对不完全时，miRNA就以抑制目的基因的表达方式作用；miRNA与目的基因某段序列配对完全时，就可能引起目的基因在互补区断裂而导致基因沉默。 MicroRNA与癌症 一、 miRNA作为抑癌基因 （1） miRNA-15／miRNA-16与慢性淋巴性白血病 Calin等的研究首次证明miRNA的失调在肿瘤的发生中起着非常重要的作用。MiRNA-15和miRNA-16定位于染色体13q14区段，该区段的局部丢失与慢性淋巴性白血病(CLL相关)，在检测的CLL病患中，有近68％的这两种miRNA完全缺失或表达下调。另外，在前列腺癌(60％)、外套淋巴细胞瘤(50％)和多发性骨髓瘤(16％～40％)等肿瘤中也常有该区段的缺失。Bcl-2蛋白是一种通过作用于线粒体来抑制细胞凋亡的蛋白，对于癌细胞的存活起着非常重要的作用。Cimmino等证实miRNA-15和miRNA-16的表达水平均与BCL-2蛋白的表达水平负相关，并且二者都在转录后水平通过靶向作用负调节BCL-2．其对BCL-2的抑制诱导了白血病细胞的凋亡。因此，miRNA-15、miRNA-16是BCL-2的天然的反式作用因子，对BCL-2过表达的肿瘤具有潜在的治疗作用。 （2） let-7家族负向调控Ras let-7家族是首批发现的miRNA之一，早期的研究表明，其功能的缺失将阻碍线虫从幼虫晚