ELSD简介及在生物碱成分分析应用.pdfVIP

2010年9月第一届环渤海色谱学术交流会(第十九届天津市色谱学术交流会)会报 ELSD简介及在生物碱成分分析中的应用 赵辉1，亓晖2，朱元元3 (南开大学药学院，天津300000) Performance 高效液相色谱(High Liquid 化，药物，环保及工业分析中普遍使用，所分析的样品范围也越来越广。高效液相色谱以其 灵敏、快捷、操作方便，适用范围广等优点，已经广泛应用于中药的有效成分含量测定、组 分分析、指纹图谱等方面。检测器是液相色谱仪的关键部件之一，高效液相色谱检测器中除 了最常用的紫外检测器之外，还有荧光检测器，示差折光检测器。蒸发光散射检测器，质谱 检测器，极谱检测器，核磁共振检测器等，本文主要介绍蒸发光检测器的应用。 1 Light Detect，ELSD)简介 蒸发光检测器(EvaporativeScattering 1．1 ELSD的工作原理 在辅助气体作用下，将流动相雾化，形成的液雾(雾珠)通过加热而蒸发，此时溶解在 流动相中不易挥发的样品即形成颗粒物，这些颗粒物由辅助气体推动进入光束通道，造成光 束散射。通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量，从而测定样品浓度。 1．2 ELSD的基本结构： 依据ELSD的设计原理，ELSD的结构由三大部分组成：即雾化雾珠处理，蒸发和散射 光检测。蒸发光散射检测器运行分为3个过程：雾化过程，即用惰性气体或纯净空气将色 谱柱的流出物雾化；蒸发过程，即在加热的漂移管中将色谱柱流出物中的流动相挥发，只剩 下挥发性较小的被检物质的粒子；检测过程，即测定不挥发性粒子对光的散射，记录其光散 射信号【嵋J。 1．3ELSD的特点 1．雾化气流的纯度和压力会影响检测器的信噪比。 2．不能使用不易挥发的物质来调节流动相的pH值；可以通过蒸发温度的调节来使比被测 物质沸点低的组分蒸发；在不能使被测物质蒸发的前提下，温度越高，流动相蒸发越完全， 色谱图基线越好、信噪比越高。 3．检测光散射变化，所有进入到散射池的物质都可被检测，而且响应值只与物质的量(质 量)有关。 4．浓度跟峰面积不成线性，分别取自然对数后成线性。 2 HPLC．ELSD在生物碱成分分析中的应用 中药的化学成分复杂，有的中药成分不存在紫外吸收或仅在紫外末端有吸收。另外由于 色谱分离的困难以及流动相带来的干扰，使用传统的紫外检测器对其进行定性定量分析十分 困难。ELSD在某种程度上弥补了这方面的不足，被广泛的应用于皂苷类成分、糖类成分、内 酯类成分、部分生物碱类成分以及其他一些成分的分析，以及中药指纹图谱研究、药代动力 学研究，并且取得了满意的结果。本文就其在生物碱成分分析中的应用作简要陈述。 李松林pJ等采用HPLC．ELSD法建立了伊犁贝母中西贝素和西贝素苷的检测法，色谱条 件：Kromasil x4．6 C18色谱柱(200ramI姗，5肛m)；流动相：乙腈：水：三乙胺(71：29： L／min。 mL／min；ELSD参数：漂移管温度88℃，氮气流速2．38 0．03，V厂Wv)，流速1．0 作者简介：赵辉(1987一)。女，山东人，硕士研究生．E．Ⅱlail：zhhbl嘲@126∞m 通讯联系人：朱元元．女．副教授，E-marl：zhuyy@nankai,edu．删 2010年9月第一届坏渤海色谱学术交流会(第十九届天津市色谱学术交流会)会报 张盛等[41建立该法测定藜芦中的介藜芦碱和藜芦胺含量的方法，并对4种藜芦属药材样 品进行了测定，色谱条件：Kromasil 氟乙酸水溶液梯度洗脱；流速0．8mL／min，柱温35oC；ELSD参数：漂移管温度98℃。载气 流速2．2L／min。 为流动相在反相C8柱上，实现了贝母类药材中6种异甾族生物碱的分离和测定，得到了良好的 重现性和准确度。 I／InIxl0．0l砌，5 我们利用ELSD，以色谱柱：HypersilSCX柱(250