国家人类基因组北方研究中心提供的人类功能基因研究对外服务技术....docVIP

国家人类基因组北方研究中心通量化细胞水平功能筛选服务 国家人类基因组北方研究中心（北京诺赛基因组研究中心有限公司）长期以来致力于人类功能基因组学研究，形成了从cDNA文库构建、大规模生物信息学分析、高通量基因克隆、高通量功能基因筛选平台的建立到单个重要生理活性的功能基因系统研究、靶标分析以及针对靶标的小分子药物筛选一整套技术路线，形成了独具特色的人类功能基因研究与开发技术平台。为促进资源共享，进一步提升我国在功能基因研究中的影响，长期开展基因和小分子药物的功能筛选服务。 我们的优势 目前，拥有超过1,0000个独立的人类编码基因cDNA 拥有超过6000个人类编码基因的真核表达质粒，可供筛选 拥有超过500个人类编码基因重组腺病毒，可供筛选 拥有的报告基因质粒pNFκB-Luc、pNFAT-Luc、pAP-1-Luc、pGAS-Luc、pCRE-Luc、pIRSE-Luc、pSRE-Luc、P53-Luc、pTARE-Luc、pHRE-Luc、IFNα1-Luc、IFNα4-Luc、IFNα6-Luc、hIFNβ-Luc、mIFNβ-Luc、pC/EBP-Luc、pERE-Luc(TATA)、pERE-Luc(TK)、pER-Luc、pSTAT3-TA-Luc、Sox4-Luc、IL8-Luc、TNFα-Luc、TbRE-Luc、GATA3-Luc、CCL20-Luc等。 拥有的GFP报告基因质粒pNFκB-hrGFP、pNFAT1-hrGFP、pNFAT4-hrGFP、pAP-1-hrGFP、PKCα/β/θ-GFP（转位分析）、I3/7-GFP（转位分析）、-GFP（转位分析）等。 拥有Tecan Genios Pro高端酶标仪，Olympus和Zeiss倒置荧光显微镜，全自动显微成像系统，芯片点样仪，流式细胞仪以及高通量自动化工作站硬件设施 成熟的功能基因研究平台（细胞信号转导通路网络测定；细胞增殖、迁移、调亡、自噬等表型测定及机制研究平台；以及完善的生物信息学服务平台可用于基因预测、转录变异体分析、基因功能预测、代谢途径分析、数据挖掘与自动化分析和处理等）。 服务方式 客户提供基因或小分子化合物，代为筛选和检测 客户定制基因（由客户选定基因类别及数量），代为筛选和检测 客户可自由提供有效的报告基因或筛选设计方案，代为筛选和检测 代为客户构建报告基因，或报告基因稳定细胞株。规模化真核及原核蛋白表达与纯化服务 服务内容： ◆原核表达 原核表达载体： 载体名称 pET系列 pET-3a pET-21c pET-22b pET-24a pET-28a pET-29a pET-30a pET-31b pET-32a pET-41a pET-42a pGEX系列 pGEX-4T-1 pGEX-4T-2 pGEX-4T-3 pMAL系列 pMAL-c2X pBAD系列 pBAD/His A pTrc99a 表达宿主细菌：BL21，BL21(DE3)，BL21DE3)pLysS，Transetta(DE3) ◆哺乳动物细胞表达 真核表达载体：pcDNA3.1(+)pcDNA3.1(-)-A/B/C，pcMV-Sport6，pCI-dhfr以及自主改造的强分泌载体 表达宿主细胞： 瞬时转染表达（293细胞系：293T，293ET，293A） 稳定表达（CHO细胞系：CHO，CHO-dhfr-） ◆表达条件优化及产物鉴定 SDS Western blot ◆ 蛋白纯化 亲和层析 凝胶过滤 疏水层析 离子交换 服务优势： 1、新型一体化服务：载体构建、蛋白表达、纯化等一体化服务； 2、表达系统多样： 具有原核细胞和哺乳动物细胞表达系统，方便顾客根据情况选择最合适的表达系统。 3、技术成熟稳定/方法手段齐全：长期从事蛋白纯化及蛋白功能研究，具备完善的蛋白纯化系统（亲合层析、离子交换、分子筛等）与先进的蛋白纯化仪器设备（AKTA蛋白纯化分析系统）。 4、蛋白纯度高：带his/GST标签蛋白纯度≥90%，不带标签蛋白纯度≥85%。可按照客户要求去除内毒素。 原核细胞表达服务流程： 步骤1、表达载体构建：合成基因（另行收费）或客户提供模板，构建2-3个表达载体也可由客户提供测序验证过的质粒（附带测序报告）（时间：7工作日） 步骤2、E. coli表达菌株筛选：表达优化和可溶性分析、SDS检测表达（时间：）步骤3、目标蛋白表达及纯化：（提供客户：纯化好的目标蛋白1-10mg及纯化报告。时间：） 哺乳动物细胞瞬转表达流程： 步骤1表达载体构建：提供或合成基因（另行收费）或客户提供模板制备可用于转染哺乳动物细胞的质粒。也可由客户提供测序验证过的质粒（附带测序报告）（时间：7工作日）步