白绒山羊性控胚胎生产及移植应用研究初探.pdfVIP

}-H舒牧兽阪学会动物繁殖学分会第十四厢学术研讨会论文炭 1．2．3精液的准备 X性控冻精的准备：从液氮中取出精液冷冻细管，在空气中停留3～5秒，置于37℃水浴中8一lO秒，待冰晶溶解 后，从水浴中取出冷冻细管。用无菌干棉球擦干冷冻细管表面水滴，置于输精器内待用。 鲜精准备：对种公羊用假阴道法进行采精。用PBS稀释5一10倍，并在稀释前后分别检查精子活力，装于输精器 内待用。 1．2．4人工授精 供体母羊发情12小时后，采用内窥镜法将X性控冻精及鲜精分别输入不同组别供体母羊子宫角内，具体方法 如下：将供体母羊倒立、腹部朝上保定子自制专用手术粲上，术部常规消毒，用手术刀在腹中线左右两侧分别切一小 口，左侧切口位置在左侧乳头的左下方，切口在左侧乳头的连线与腹中线呈450角、距左侧乳头基部及腹中线约 3．5cm的位置，右侧切口位置选在右侧乳头的右下方，其它参数与左边切口相同。用专用打孔器在切口处将腹壁穿 透，从左侧孔插入腹腔内窥镜，右侧孔插入输精器，二者协同操作，将精液分别输入左右两侧子宫角内。 1．2．5冲卵及检卵 在供体母羊输精后48小时，采用常规手术法从输卵管中冲卵网。对回收的卵子进行镜检。统计受精卵数及受精 卵发育情况，选取可用胚胎置于胚胎保存液中待移植， 1．2．6受体母羊的同期发情及胚胎移植 在对供体羊超排处理的同时，对受体羊进行同期发情处理。采用埋植阴道海绵栓和注射PG的方法，进行同期发 情处理。撒栓后用试情公羊进行试情，记录发情母羊，并开始禁食禁水。应用常规手术法进行胚胎移植凹：将冲出的 4~8细胞期胚用移卵器从喇叭口向输卵管内插入约5～8cm，将胚胎连同少量胚胎保存液一同移入输卵管内。到预产 期时，现场对移植产羔受体母羊生产及羔羊性别等记录并照相。 l-2．7统计分析 采用四格表×2检验生物统计学方法对实验结果进行统计分析Ⅲ1。 2结果 2．1不同类型精液输糟供体母羊卵子回收结果 不同类型精液输精供体母羊卵子回收结果如表l所示：应用性控冻精和鲜精输精供体母羊的平均排卵点及平均 29．6％，极显著地低于鲜精组94，O％的比例(po．01)。 表1．不同类型糟液输精供体母羊卵回收及卵受精情况比较 注：abP(O．01 2．2不同类型胚胎移植结果 不同类型胚胎移植受体母羊产羔结果如表2所示：性控胚胎移植受体母羊产羔率42．2％(19／45)，极显著地低于 (J 9／19)，极显著地高于普通胚胎移植受体母羊所产羔羊57．4％(31／54)的性别准确率， 3讨论 的超排处理时间条件下，得到的平均排卵点为13．14个，胚胎回收数平均为12，56枚旧，说明本实验使用的超排方法 已达到较为理想的效果。 3．2性控冻精和鲜精输精在相同的超排处理和相同操作条件下，性控冻精输精组回收卵中受精卵所占比例比鲜 精输精组低，二者差异极显著(P0．01)，其原因町能是：第一、性控冻精的精子浓度低。分离过程中对精子进行了 精相比。多了分离的过程，在这个过程中势必要消耗一定的能量，与鲜精相比其存活时间相对缩短，在与鲜精相 同的时间内输精，可能存在性控冻精在未与卵子相遇即死亡的可能性，致使供体母羊超排卵的受精率下降，这一 点将在今后的研究中进一步探讨。第三、分离精子人工授精的受胎率只有常规冷冻精液的70％～80％，若营养条 件等因素跟不上则受胎率会更低【101。分离过程中精子染色、激光照射、高倍稀释作用及分离过程中的高压鞘液对 精予膜的破坏作片j等，对耩子都会有不良影响f10．ul。此外，分离后冷冻过程也会对精子造成小良影响。如何降低这 52． 衰2不同类基珏腑善擅群母革产羔爰蒜羊性别准蠢奉比较 羔羊(只) 胚胎类型 移植受体(只) 产羔受体(％) 合计——砸匹1磊r——————磋硅1百广———一 性控胚胎 45 19(42∥) 19 19(10口) o 93 6) 54 23(426) 普通胚胎 54(581 31(57一) 注：a曲p呻0l、cⅪP咖01 种影响还有待进一步研究。 3．3性控胚胎和昔叠妊胎罄擅用性控胚胎移植受体母羊的产羔率为422％，极显著地低于用昔通胚胎移植受体母羊 58I％的产羔率(P哪01)。导致性拉胚胎移植受体母羊产羔率低的原因可能有咀下