实验十胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响.pptVIP

实验十 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 注射激素和取血 计算注射剂量：胰岛素为0.75U/Kg体重，肾上腺素为0.4mg/Kg体重； 皮下注射激素； 注射激素后取血，时间：肾上腺素30min，胰岛素1h（心脏取血）； 采血后静置10min至血清析出； 3000r/min离心分离10min，吸取血清至新的EP管中，做好标记。 * * 原理 胰岛素能降低血糖，肾上腺素能升高血糖 给动物注射胰岛素或肾上腺素 取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量 通过公式计算血糖改变百分率 血糖改变%= 注射后BS－注射前BS 注射前BS ×100% 原理 葡萄糖＋ O2 ＋ H2O GOD 葡萄糖酸＋ H2O2 本实验是葡萄糖氧化酶 (GOD)和过氧化物酶 (POD) 相偶联发生的偶联反应 2H2O2＋4-氨基安替比林＋酚 POD 红色醌类化合物＋H2O 操作步骤 动物准备 注射前取血 注射激素 注射后取血 计算结果 称体重，重的注射胰岛素，轻的注射肾上腺素 已准备 腹部皮下45°注射，不要穿入腹腔内脏 作好标记 防止溶血 测定血糖 加样要准 反应时间一致 505nm比色 取小试管4支，编号，按下表操作： 加入物 (ml) 空白管 标准管 测定前 测定后 血清 － － 0.01 0.01 葡萄糖标准应用液 － 0.01 － － 蒸馏水 0.01 － － － 酶酚混合试剂 1.50 1.50 1.50 1.50 血糖测定 混匀，置37°C水浴中，保温15min，加2.0ml H2O混匀后在波长505nm处比色，以空白调零，测定各管吸光度。 注意事项 1. 腹部皮下注射 ，以45°进针，针头不要刺 入腹腔，更不要穿破皮肤注射到体外。 2. 最后加酶酚混合试剂，各管反应时间应一致。 3. 葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄 糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含 量