组织工程化喉软骨构建.pdfVIP

ScienceResearch ．263． 生命科学研究Life 组织工程化喉软骨的构建① 孙安科1，胡 平2，裴国献1，陈江睿2，任高宏1，胡罢生1，张宇1，革 昱1 (1．第一军医大学南方医院全军创伤骨科中心组织工程研究中心．广州510515I 2．清华大学化学工程系，北京100084) [摘 要]目的：研究组织工程化喉软骨的构建方法。方法：酶消化获取乳兔肋和关节软骨细胞并 进行体外培养，传代时适当延长胰蛋白酶作用时间，收集第3～4代培养细胞用于实验；采用溶剂浇 铸、模压成形和颗粒滤沥技术制备喉形态PHBHH生物支架材料塑形物，接种软骨种子细胞形成 细胞一PHBHH复合物，体外共同培养l周，然后分别用网膜充填与包裹、腹内成形(n=9)和脊背 部筋膜瓣与肌肉组织共同充填与包裹、皮下成形(咒一9)的方法将负载软骨种子细胞的喉形态材料 塑形物植入新西兰大白兔体内，设空白对照组(每批7／一3)。术后一定时问取材，通过大体形态观 察、组织学染色和免疫组织化学检测，对组织工程化喉软骨的成形与再生情况进行评估。结果：获 塑形物呈中空半面喇叭状，棱角分明，液体(乙醇)静态客积测量法测定其孔隙率90％。扫描电 镜结果表明材料与细胞黏附状况良好，分布均匀。2种体内植入法均构建出喉形态组织工程化组 织，大体形态维持良好，组织学和免疫组织化学均证实为软骨组织，且形态学和组织学表明两者基 本一致。结论：胰酶作用时间调整后收获的软骨种子细胞在有免疫力的动物体内成软骨效应良好， 免疫排斥反应不明显；PHBHH可作为组织工程支架材料用于喉形态塑形物的塑形与组织工程化 软骨的构建；网膜充填同包裹和肌肉与筋膜辨共同充填与包裹技术有利于组织工程化喉软骨的形 成，具有临床应用潜力。 [关键词]喉；组织工程；软骨；大网膜；筋膜辩；移植；同种；聚羟基烷酸酯 of Fabrication laryngealcartilageby meansoftissue engineeringtechnique SUNAn-kel，HU Guo-xianl，CHEN Pin92，PEI Jiang—rui2， REN Yul Gao-hon91，HUBa—shen91。ZHANGYul，QING (1-Centreof and ofPLA， OrthopaedicsTraumatology，NanFangHospital TheFirst Medical Military University，Guangzhou510515，China； 2．MolceularResearchInstituteofChemical 100084，China) Engineering，TsinghuaUniversity，Bering themethodof tissue EAbstract]Objective：Toexplore fabricatingengineeredlaryngealcartilage． fromtheribandarticular ofinfantNewZealanwhiterabbits Methods：Thechondrocytes