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HIV质控血清制备 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心 王冬莉（2010年全球基金） 室内质量控制 每一次实验必须使用室内质控品，以便监控 实验的重复性  同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异 室内质控品的管间或瓶间变异必须小于监测 系统预期的变异（cv＜20% ） 并且质控品应稳定、无菌，且不含有影响试 剂反应的防腐剂 室内质量控制  在每次实验时应设置一个质控品即弱阳性对照。这个弱 阳性对照的值以设定在该试剂盒Cut-off值的（S/CO 比 值）2－3倍为宜。  室内控制的目的在于控制试验的重复性及精密度。  设立外部对照还可以提示标本处于临界值状态时的检验 操作情况。 质控血清的制备  HIV抗体阳性标本的收集：要求无溶血、无黄胆、 无脂血、无染菌、HIV抗体反应阳性的血浆或血清。  HIV抗体阴性标本的收集：要求无溶血、无黄胆、 无脂血、无染菌、HIV抗体反应阴性的血浆或血清。  56℃30分钟灭活阳、阴性血清，3000rpm离心 15--20分钟 质控血清的制备 准 备：将10个1.5ML离心管排列在试管架上 稀释度：1号管标明1:100；2号管标明1:200； 3号管标明1:400；以此类推，标明倍比稀 释度至1:102400 加血清：1号管加阴性血清1 ML ；从2号管至10号 管均加阴性血清0.5 ML 质控血清的制备 加血清：1号管加阳性血清10μl （1:100），换新管尖混 匀后，从中吸取0.5 ML沿管壁加入2号管内。换 新管尖进行混匀，从中吸取0.5 ML沿管壁加入3 号管内。每个稀释度均要换新吸头，以此类推至 10管。 检 测：根据制备质控血清要求选择试剂盒。将上述已稀 释血清按试剂盒操作要求进行检测。每个稀释度 1孔。 质控血清的制备 OD值：根据试剂的CUT OFF值（0.12 ）的范 围，选择质控血清OD值在0.4—0.5左 右的稀释度。 例： 1 ∶6400的稀释度的OD值在0.4-0.5左右。 则吸取1号管内的1:100稀释的血清 加入6.4 ML阴性血清内。彻底混匀。 质控血清的制备 复检：再用相同的试剂盒进行检测。平行检测4孔以 上。观察试验结果的S/CO 比值是否在2—3倍 范围(CO值为0.12，S值应为0.24—0.36之间)、 4孔间的平行性是否良好。 如结果不理想，则重新检测或重新稀释。 如结果达到要求，则按实验要求，每管分装一 次实验的用量。--20 ℃冷冻保存。 绘制质控图  外部质控品的均值和标准差应建立在实验室常规使 用方法对外部质控品重复测定的基础上  一般采用在不同批次检测取得至少20个数据  如果仅做少量批次的检测，也至少做5个批次的检 测，每个批次中不少于4个质控血清测定结果，以 建立一个临时性的均值和标准差  当达到20批次数据后，替代临时性的均值和标准差 绘制质控图 建立质控图参数  算术平均值代表一组S/CO 比值的平均值。为了统计 学上有显著性意义，应该采用至少20次(天)所测得 的外部对照质控血清S/CO值结果计算出平均值。 x 计算公式为： Σ x x = ── n