10%25中性缓冲福尔马林固定组织HE染色的改良方法.pdfVIP

· 934 · 临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2014Aug；30(8) 网络 出版时间：2014—8—1609：01 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．13315／j．cnki．cjcep．2014．08．029．html 胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用 杨小苗，申成香，司有谊，怀建国 关键词：细胞沉渣；胸腹水 ；石蜡切片；染色 同的方法制片。 中图分类号：R361 文献标志码：B 1．2 方法 文章编号：1001—7399(2014)08—0934—02 1．2．1 普通细胞涂片制作 送检胸腹水静置 30min，弃上 doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2014．08．029 清液，留取底层液体25—50m1(视标本 的情况而定，若送检 胸腹水过于澄清，为保证细胞量足够，可全取)，放入离心管 ， 送检胸腹水标本通常处理方法是离心后涂片，95％乙醇 2500r／min离心 10min，离心后用吸管吸掉上清液 ，取沉淀 固定染色后显微镜下阅片。在实际工作 中发现该方法制出 物上层细胞，滴于载玻片并涂片，待玻片中间部分稍干后放 的切片镜下观察细胞不集中，且数量不多，如果发现可疑细 人95％乙醇内固定 10—15min，常规HE染色。 胞，诊断医师则需冒很大风险去诊断该病。因此，我们把细 1．2．2 细胞沉渣切片制作 送检胸腹水静置30min，弃上 胞沉渣石蜡切片及免疫组化技术应用于胸腹水的制片中，经 清液 ，留取底层液体25—50ml(视标本的情况而定 ，若送检 过反复实验，发现送检胸腹水离心后 ，将沉淀物再处理，然后 胸腹水过于澄清，为保证细胞量足够，可全取)，放入离心管， 常规脱水、浸蜡 、包埋、切片、染色后 ，细胞明显增多且集中， 2500r／min离心 10min，离心后用吸管吸掉上清液，向含沉 大大提高阳性诊断率，也提高诊断医师的阅片速度。 淀物的离心管内加入 10％中性福尔马林 20ml，放入振荡 仪，1200r／min振荡 10min，2500r／min离心 10min，倒去上 1 材料与方法 清液用镊子取出沉淀物，用擦镜纸包好，常规脱水、浸蜡、包 1．1 材料 收集2010年 1月一2013年 12月芜湖市第一人 埋、切片、染色。 1．2．3 血性标本前处理 如果送检胸腹水中含血性成分较 民医院送检的胸腹水标本276例，每例标本分别采用两种不 多时，则需对离心管内沉淀物进行清洗，以此去除红细胞 ，减 少无关细胞的干扰。此时可加入冰醋酸与乙醇混合液20rnl 收稿 日期：2014—02—19 作者单位：安徽省芜湖市第一人民医院病理科，芜湖 241000 (25％乙醇95ml，冰醋酸5m1)…，混合后再离心，加入 10％ 作者简介：杨小苗，女，技师。E-mailqq．com 中性福尔马林 固定、振荡离心等步骤。 怀建国，男，硕士，副主任医师，通讯作者。E—mail：Huai— 1．2．4 细胞量较少的标本制作 如果送检胸腹水离心处理 jso415@126．corn 后发现细胞量较少，则可以利用蛋清液作为支架法 制作细 性。其还可克服普通 10％福尔马林固定液存在过度酸化和 染色中，切片经水洗进入苏木精染液时不可避免地会带人一 甲醛色素形成的缺点 。但是使用 10％中性缓冲福尔马林 些水份 ，使染液的pH值逐渐升高，致使苏木精液易被氧化和 固定的组织，因固定剂的pH值为7．2—7．4，细胞核内物质环 蓝化，使苏木精液逐渐失效。组织切片经4％乙酸再进入 境pH值也是7．2～7．4，有利于