提高骨髓石蜡切片质量的几点体会.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 ChinJClinExpPathol 2011Jan；27(1) 。107 · 提高骨髓石蜡切片质量的几点体会 甘启焕 ，杨清绪，沈 琴，朱淑玲 关键词：骨髓；石蜡切片；质量控制 合脱钙液里含有盐酸 、甲醛、甲酸、氯化铝、冰乙酸和生理盐 中图分类号：R446．8 文献标识码 ：B 水。盐酸为强酸，它不会使组织膨胀 ，而是使组织略有收缩。 文章编号：1001—7399(2011)O1—0107—02 冰乙酸不但具有在固定时穿透速度快，且可防止组织内 自溶 变性的特点 ，同时还能使组织略膨胀，可抵消盐酸甲醛引起 随着血液学的高速发展，近年来骨髓活检也越来越多地 组织的收缩和硬化 J。这种脱钙液在脱钙的同时具有再固 应用于临床。骨髓活检组织制片也是科研和临床病理经常 定的作用，彻底去掉钙盐并有效地保护骨组织。另外脱钙时 遇到的重要技术问题。现在大多数单位都采用石蜡切片技 还要注意：(1)脱钙液的用量要充足，最好为标本体积的 10 术制作骨髓活检组织 ，但因骨髓组织富含钙盐及含有一定量 — 20倍，并及时更换脱钙液，当组织在脱钙液里浸泡 1h后 的脂肪 ，按常规技术制作 ，常出现组织切片不完整 、结构破 即更换为新的脱钙液，这样可以使骨髓组织有效和快速地去 坏、染色模糊不清，不利于诊断。另外石蜡制片的程序繁多 ， 掉钙盐。整个脱钙过程一般更换 1次就行。(2)脱钙液用 任何一个环节出现问题，均可影响切片的质量，而直接影响 密闭容器盛装 ，以防酸性脱钙液的挥发。(3)掌握脱钙终点 病理报道的准确性。影响骨髓石蜡切片质量是多方面的，其 的判定，以骨髓组织浮起或大头针能顺利穿过组织表明脱钙 中骨髓组织固定、脱钙、除酸、切片、染色等关键环节处理不 完全。这个过程大概需要 2～3h，如室温较低 ，可放在 37 当均可导致切片质量不高。为此，本文就提高骨髓石蜡切片 恒温培养箱里加温。 质量谈几点体会。 3 除酸 1 组织 固定 骨髓组织脱钙后 ，组织带有酸性，切片 HE染色时胞核 骨髓组织脱钙前必须先充分固定。如果组织未充分固 着色暗淡，核质对 比不清晰。因此组织脱钙后要花长时间水 定的情况下加入酸类脱钙液，组织形态结构及细胞 内各种成 流冲洗中和进入组织中的酸，在苏木精染色时间要延长。本 分就会被破坏。骨髓活检组织用 10％中性福尔马林 固定液 文发现，应用 1％氢氧化钠溶液处理5min，再用流水冲洗 10 固定能得到较好的效果。福尔马林溶液具有渗透力强，固定 min，就可彻底除去酸，因1％氢氧化钠溶液是一种强碱稀溶 均匀 ，对组织收缩较少的特点 ，此固定液对需做免疫组织化 液 ，能很快渗人到组织细胞中中和酸，缩短了流水冲洗时间。 学染色的组织固定效果特好 。本文选择 10％中性福尔马 以往组织脱钙后还需2h流水冲洗以中和进入组织中的酸。 林固定液。新鲜的骨髓活检组织置入固定液后送至病理科 ， 而水洗又易造成固定不 良组织的膨胀变形 ，染色效果不好 ， 签收后立即更换为 10％中性福尔马林进行固定。上午送检 影响镜下观察。而用此法除去组织里的酸只需 15rain。骨 的骨髓置入固定液后，须到下午上班时才更换为脱钙液；下 髓组织经过 1％氢氧化钠溶液除酸后制成的切片对苏木精 午送检的须到第2天上午才更换为脱钙液，固定时问≥6 嗜染性强 ，与非脱钙组织切片同时进行 HE染色，染色效果 hl2。依上述操作方法，骨髓组织结构形态和各成分均能得 均好，弥补使用旧方法脱钙液后切片需延长苏木精染色时间 到保护。 的不足。