实验用猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的建立及初步应用.pdfVIP

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2017-08-08 发布于安徽
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实验用猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的建立及初步应用.pdf

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2010广州一东莞首届国际小型猪学术论坛实验用猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的建立及初步应用★ 李春华1，胡建华2，张婉华1，孙凤萍1，高骏1，王英1，蒋风英1 (1．上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海201106：2．上海实验动物研究中心，上海200032) 【摘要】目的建立实验用猪伪狂犬病病毒(PrV)的PCR检测方法。方法根据PrV gB基因序列，应用primer 5．0软件自行设计、合成一对引物进行PCR反应，优化反应条件，建立检测PrV的PCR方法，并应用于临床样品的检测。结果以PrV上海株细胞培养物DNA为模板，扩增出263 bp的特异性条带，对扩增产物进行克隆测序和BLAST PCR方法敏感、特异，可用于实验用猪伪狂犬病病毒的快速检测。【关键词】伪狂犬病病毒；PCR；检测 for Establishmentand of ChainReactionDetection ApplicationPolymerase ofPseudorabiesVirusinExperimentalPigs LI Chun．hual，HUJian．hua2，ZHANGWan．hual，SUN Feng．pin91，GaoJunl，Wang Yin91，JIANGFeng-yin91 ofAnimal and (1．Institute Veterinary Sciences， Husbandry Sciences，ShanghaiAcademyofAgricultural 2011 AnimalResearch Shanghai Laboratory 200032，China) 06，China；2．Shanghai Center,Shanghai To themethod chain detectionofthe establish [Abstract]Objective ofpolymerasereaction(PCR)forpseudorabies A of were and tothe of virus(PFV)in designed experimentalpigs．Methodspairprimers synthesizedaccordingsequence reaction gBgeneofPrV．PCRmethodforPfVWSSestablishedbyoptimizingthe as inclinical The263 was theDNAofPrVSHstrain samples．Resultbpproductamplifiedspecificallybyusing template． The wascloned vectorand ofnucleotideofthis