3种常用抗癌药物对人肝癌细胞HepG2抑制作用的研究.pdfVIP

中国中医药咨讯 2011年7月 第3卷 第 19期 · 46 · JoumalofChinaTraditionalChineseMedicineInformation July 2011 Vo1．3 No．19 3种常用抗癌药物对人肝癌细胞 HepG2抑制作用的研究 钟琳 (随州市中心医院药剂科 ，湖北 随州，441300) 【摘要】 目的：研究3种常用抗癌药物对于HepG2细胞的抑制情况。方法：细胞铺 96孔板，3种抗癌药物以不同浓度给 药，每浓度设3复孑L，不加药组做空白对照，MTT法测定，以抑制率对药物浓度作图。结果：在 1～420 L浓度范围内，5一氟 尿嘧啶抑制效果最差：20～300 gm／E丝裂霉素c抑制效果好于长春新碱；1～20 g／mL和300～420I．Lg／mL浓度范围内，长春 新碱抑制效果好于丝裂霉素c。结论：该方法评价对比了3种常用的抗癌药物对于人肝癌细胞的抑制效果，为药物筛选中阳性 药物的选择提供一定借鉴。 【关键词】MTr；HepG2；半数抑制浓度；5一氟尿嘧啶；硫酸长春新碱 ；丝裂霉素C 人肝癌细胞系HepG2自建立以来，已成为进行抗癌药 箱培养 24h。 物筛选及研究肝癌发病机制的重要细胞系，陈富强等对 2．2 细胞给药 25mg／mL的5一氟尿嘧啶溶液以PBS稀释， HepG2细胞系进行了生长曲线、分裂指数染色体核型等生 lmg硫酸长春新碱粉末 、5mg丝裂霉素 c粉末均溶于 物学特性的研究。目前，该细胞系已经广泛应用于基因表 1mLPBS溶液，分别制成5、1、5mgm／L的储备液。以DMEM 达、内源性物质作用机制、外源性物质影响以及病毒感染机 培养基稀释储备液，得到一系列浓度的药液；96孔板弃去 制的研究中。在利用该细胞系进行抗癌药物筛选时，通常选 原液，每孔先加入 100 LDMEM培养基，再加入 100 L 择一种临床常用药物作为阳性对照，以考察待筛选药物的 稀释后的药物溶液 ，板上终浓度均为 ：1、3、10、15、30、45、 活性。但是，临床药物种类繁多且效果各异，选择阳性对照 60、120、180、240、300、360、420 gm／L，每个浓度设 3个复 药物时缺乏依据，因此本研究采用MTY法研究了3种较为 孔，以不加药组为空白对照；加药完毕后移入 37℃CO：培养 常用的抗癌药物——5一氟尿嘧啶、硫酸长春新碱 、丝裂霉 箱培养。丝裂霉素遇光易分解，故配药及给药时需避光进行 素c对于HepG2的抑制情况，并对其抑制情况的差异进行 操作。 研究，为利用该细胞系进行药物筛选实验时阳性对照药物 2．3 检测方法 给药培养 48h后 ，弃去孑L内液体 ，加 DMEM 的选择提供一定借鉴。 培养基 190 L，孑L和MTI(5mg／mL)10 L／孔。37~5％CO2 1 材料 培养箱中温孵4h后 ，弃板上各孔内原有液体 ，加 DM— 1．1 药物与试剂 5一氟尿嘧啶(批号080806)、硫酸长春新 S0200 L／孔以溶解甲膜沉淀。室温置30min后，用酶标仪 碱(批号0806V1)和丝裂霉素c(批号349AGK)分别为上海 在570nm波长下测定各孔光密度值 (OD)。计算药物抑制 旭东海普药业有限公司、~：VII万乐药业有限公司和协和发 率：药物抑制率=l一实验组光密度值 ／对照组光密度值 X 酵工业株式会社的产品；四甲基偶氮唑盐 (Mrrr)购 自Sigma 100％，以药物抑制率对浓度作图。 ‘ 公司；胰蛋白酶购 自上海吉泰科技有限公司；DMSO培养基 3 结果 和胎牛血清购自Gibco公司；青霉素和链霉素购 自华北制 本文采用MTT法研究了3