武汉市儿童医院临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中产质粒介导AmpC酶和ESBLs的研究.pdfVIP

448 中国感染与化疗杂志2008年 I1月20日第 8卷第 6期ChinJInfectChemother，November 2008，Vol8，No 6 · 实 验 研 究 武汉市儿童医院临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中 产质粒介导AmpC酶和 ESBLs的研究 虞 涛， 李长振 ， 鲍连生， 杨劳荣， 游上游 摘要 ： 目的 研究武汉市儿童医院临床分离高产质粒 AmpC酶和超超广谱 0内酰胺酶 (SSBI)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌 的分子流行病学特征 。方法 收集我院 2005年 8月一2)(()6年 8月住院患儿临床分离的头孢西丁 中介或耐药的大肠埃希菌 和肺炎克雷伯菌 161株。采用三维试验检测 AmpC酶 ，表型确认试验检测 ESBIs，质粒转化试验定位耐药基 因；采用 PCR技 术扩增质粒 AmpC与 CTX—M基 因；使用限制性片段长度多态性 (RFIP)技术确定 CTX—M基 因簇 的特征 ；利用基 因测序确定 AmpC酶及 CTX—M 的基因亚型。结果 DHA一1型和 ACT 1型为主要 的质粒 AmpC酶基因型，发现 1种新的ACT型质粒 AmpC酶，其与 ACT一1的同源性仅为 84 。CTX—M一14型和 CTX—M一3型为主要 的ESBLs基 因型。最常见的大肠埃希菌 SSBI基 因组合为 CTX—M一14+DHA一1+ACT一1型，肺炎克雷伯菌的为CTX—M一3+DHA一1+ACT一1。结论 我院临床分离 的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌 中，产SSBI菌株所 占比例显著高于单产质粒AmpC酶菌株 ；CTXM一14／CTX—M一3+DHA一1+ ACT一1是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最常见的SSBI基 因型。 关键词 ： 质粒 AmpC型 p内酰胺酶； 超广谱 p内酰胺酶 ； 超超广谱 p内酰胺酶 ； 儿童 中图分类号：R378．21；378．996 文献标识码 ：B 文章编号：1009—7708(2008)06—0448一()4 Theplasmid_。mediatedAmpCbetal‘actamaseandextra。。extended—spectrumPlacta— maseintheEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniaestrainsisolatedfrom Wu- hanChildrensHospital YU Tao， LIChang—zhen， BAOLian—sheng， YANGLao—tong， YOUShang—you． (Departmentof LaboratoryM edicine，W uhanChildren8Hospital，W uhan 430016，China) Abstract： 0bjectiveTostudytheproductionofplasmid—mediatedAmpC口一laetamasesandextra—extended—spectrum 口一lacta— mase (SSBIs)inEscherichiacoliandK lebsiellapneumoniaestrainsisolatedinW uhan．M ethodsA tota1of161strainsofce— foxitin-resistantor—intermediateE．coliandK ．pneurnoniaewerecollectedatW uhanchildrenshospitalfrom August2005to August2006．Three—dimensionalextracttestwasusedforprimaryanalysisofplasmid—mediatedAmpC—lactamases．Phenotypic confirmatorytestwasappliedfordetectingESBIs．Transformationexperimentwasdonetopositiondrugresistantgene Uni— ． versalprimerPCR forAmpCandCTX—M geneamplif