饲用纤维素酶及其应用研究进展.pdfVIP

酶制剂磊淼剥襞糕祸而丽丽『—————————————一 饲厕纤维素酶厦其座厕研究进展 吕东海1，周岩民2，李如治2 (1．广东溢多利生物科技股份有限公司，珠海519060； 2．南京农业大学动物科技学院，南京210095) 摘要：纤维素酶是指能降解纤维素的一类酶的总称。本文垒面论述了纤维素酶的组成与分 类、纤维素酶的分子结构与功能、纤维素酶的来源和S-业生成、纤维素酶的作用机制、纤维 素酶在畜牧业中的应用及存在的问题。 关键词：纤维素酶；功能；生产；应用 纤维素是地球上最廉价、最丰富的可再生资源。全世界每年的植物体生成量高达1500亿t干物 质，其中纤维素及半纤维素的总量为850亿t(汪维云等，1998)。随着世界人口的骤增，资源面临短 缺的危机。如何有效的利用纤维资源对解决环境污染、食品短缺及能源危机等具有重大现实意义。利 的研究越来越引起人们的重视。纤维素酶于1904年在蜗牛消化液中最先被人们所发现，1945年在微生 物中发现了此酶，此后，纤维素酶的研究和应用便逐步受到世界各国的关注。纤维素酶作为饲料添加 剂始于20世纪70年代，我国纤维素酶的研究工作开始于20世纪60年代初，近十年来，开始作为饲料 添加剂应用到饲料工业中，取得了一定的效果。下面主要就纤维素酶的结构、功能特性、应用研究现 状及前景作一综述。 1纤维素酶的组成与分类 纤维素酶是指能降解纤维素的一类酶的总称，是一个由多种水解酶组成的复杂酶系，主要来自于 真菌和细菌。根据各酶功能的不同主要分为三类：(1)葡聚糖内切酶(1，4-口-D-gluam 用于纤维素内部的非结晶区，随机水解pl，4糖苷键，将长链纤维素分子截短，产生大量带非还原性末 端的小分子纤维素；(2)葡聚糖外切酶(1，4甲-D-出cm 用于纤维素线状分子末端，水解 痦水解成葡萄糖分子(Reese等， 纤维素酶 2纤维素酶的分子结构与功能 纤维素酶分子具有类似的结构，均由催化结构域(catalytic lulose．binding (1)催化结构域：呈球形，主要体现酶的催化活性及对特定水溶性底物的特异性。内切酶的活性 位点位于一个开放的裂1：3(cleft)中，它可结合在纤维素链的任何部位并切断纤维素链。外切酶的活性 位点位于一个长环状通道中，它只能从纤维素链的非还原性末端切下纤维二糖。 (2)纤维素结合结构域：CBD在纤维素酶中位于肽链的氨基端或羧基端，通过连接桥与催化结构 lo个家族，大部分的CBD位于家族I、Ⅱ、Ⅲ。人们推测，CBD可能通过芳香环与葡萄糖环的堆积力 吸附到纤维素上，由CBD上其余的氢键形成残基与相邻葡萄糖链从纤维素表面脱离开来，以利于催化 维小体(celluosome)吸附纤维素的。 (3)连接桥：连接桥主要是保持CD和CBD之间的距离，也可能有助于不同酶分子间形成较为稳 定的聚集体(阎伯旭等，1999)。细菌纤维素酶的连接桥富含脯氨酸、苏氨酸，而真菌纤维素酶的连接 维素酶有两个酶切位点可将CBD与连接桥分别切去，而真菌纤维素酶一般只有一个酶切位点可将CBD 与连接桥一同切去(阎伯旭等，1999)。 3纤维素酶的来源和工业生产 3．1微生物来源 3．1．1真菌源 所有能分解晶体纤维素的真菌，均能或多或少的分泌纤维素酶，所以纤维素酶的真菌性来源非常 广泛。目前研究和生产中采用的菌种大多是木霉、曲霉和青霉等。有人综述了纤维素酶的来源，认为 绿色木霉的得率最高(h登攀，2000)。目前研究的热点之一是通过对已知纤维素酶产生菌进行诱变， 酶产量和质量的重要方法。通过克隆出真菌的纤维素酶基因，将其与高效表达基因的启动子和染色体 起始位点融合则可表达，并且表达量增加；同时利用基因工程手段对纤维素酶分子进行改造，增加其 活性并提高耐受性。 3．1．2细菌源 能分解纤维素的细菌如纤维黏菌、热纤梭菌及纤维杆菌等亦能分泌纤维素酶。但由于细菌 纤维素酶量少(低于0．1g／L)，且产生的酶属胞内酶或黏附在细胞壁上，难以进行工业化生产 很少用细菌作为纤维素酶的生产菌种。不过近年来国外亦有利用纤维