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* 动物组织中 核酸的提取及其组成成分的鉴定 生物化学与分子生物学实验 CQMU 2008 添教材 实验思路 动物肝组织 提取 （匀浆） 核酸 分离 （离心） 水解核酸 核酸沉淀物 糖、磷酸、碱基 分别鉴定 实验目的 了解本实验设计思路 学习离心技术，掌握离心机的正确使用 氨基萘酚磺酸 浓酸 【鉴定的原理】 核糖 糖醛 + 3，5二羟甲苯（地衣酚） 绿色复合物 3H2O 磷酸 + 钼酸铵 磷钼酸 还原 钼兰（兰色） 脱氧核糖 浓酸 ω-羟基γ-酮基戊醛 + 二苯胺 3H2O 兰色化合物 【操作】 1.制备匀浆 猪肝 + 沙 + 研磨匀浆 + 生理盐水 2.分离抽提 肝匀浆倒入刻度离心管 立即加入2%三氯醋酸4ml搅匀 静置、离心（3000转/分，3分钟）、倾去上清液 沉淀物中再加入10%NaCl溶液4ml搅匀 再置于沸水浴中加热5分钟，用玻棒不断搅拌 取出冷却后再离心（3000转/分，3分钟） 将上清液倒入小烧杯内 取4ml 95%乙醇，逐滴加入小烧杯 白色沉淀物，静置5分钟，转入离心管 再离心（3000转/分，3分钟） 倾去上清液，即得到核酸纳的白色沉淀 3.核酸水解 含有核酸离心管 加入5%H2SO4溶液4ml 用玻棒搅匀，在沸水中加热5分钟 核酸水解液 4.RNA和DNA成分鉴定 1）磷酸鉴定：取试管2支，分别标明测定管与对照管，按讲义操作（观察颜色有何不同） 2）核糖鉴定：取试管2支，分别标明测定管与对照管，按讲义操作（比较两管颜色） 离心机使用注意事项： 1.记住离心管编号； 2.离心管必须先平衡后才对称放入离心机； 3.避免液体洒在离心机上面或钻头中； 4.启动后，如有不正常噪音或震动，立即切断电源，分析原因，排除故障。 * * *
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