几种植物组织总RNA提取方法的特点及疑难对策.pdfVIP

安徽农业科学 , Journal of Anhu i A gri. Sci. 2009 , 37 ( 18) : 834 1 - 8342 责任编辑 　常俊香 　责任校对 　施倩倩 几种植物组织总 RNA 提取方法的特点及疑难对策 1 2 1 ( ) 杨占军 ,谷守琴 ,张 健 　 1. 准阴师范学院生物系 ,江苏淮安 223300; 2. 保定学院生物系 ,河北保定 07 1000 摘要　植物组织总 RNA 的提取方法较多,在提取过程中会遇到酚类物质、多糖和蛋白质的干扰及外源 RN ase污染等问题 ,笔者对几种 植物组织总 RNA 提取方法的特点、提取过程遇到的问题及解决问题的对策进行了简要介绍。 关键词　植物组织; RNA ;提取方法 ( ) 中图分类号　S188　　文献标识码　A　　文章编号　0517 - 6611 2009 18 - 0834 1 - 02 Character istics of Severa l Extraction M ethods on Tota l RNA in Plan t T issues and Stra teg ies to Problem s ( ) YA NG Zhan jun et a l　 B io logy D ep artm ent of Huaiyin Norm al College, Huai ′an, J iangsu 223300 A b stract　There were m any extraction m ethod s on total RNA in p lant tissue s and more p rob lem s in extraction p rocess, such as the interfer ence of phenolic compound s, polysaccharide s and p rotein and the pollu tion of RN a se. The au thor briefly introduced the characteristic s of sev eral extraction m ethods on total RNA in p lant tissues, the p rob lem s in extraction p rocess and the strategie s to p rob lem s. Key words　Plant tissue s; RNA ; Extraction m ethod s 　　植物组织总 RNA 的提取是分子生物学研究的基础 ,在 用无水乙醇或异丙醇沉淀总核酸 , 然后再选择性地分离 进行 Northern杂交分析、基因体外翻译、cDNA 文库构建、cD 出 RNA 。 ( ) ( [ 3 ] [4 ] NA 末端快速扩增 RACE 、差异显示反转录 PCR DDRT 1. 4　热硼酸法 及改良热硼酸法 　该技术将硼酸缓冲体 ) 系、蛋白酶 K消化蛋白和氯化锂选择性沉淀 RNA 等步骤偶 PCR 等研究时均需要高质量的 RNA 。但植物组织 RNA 的 提取较动物和微生物困难 ,原因是植物具有坚硬的细胞壁 , 联在