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杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物 消毒 disinfection 灭菌 sterilization 无菌 asepsis 防腐 antisepsis 防止或抑制体外细菌生长繁殖 不含活菌 杀死物体上的所有微生物 无菌操作 antiseptic technique 抹布上的细菌 菜板上的细菌 ? 热力灭菌法 一、物理消毒灭菌法 高温杀灭細菌 焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法 干烤----加热160～180℃ 2小时 干热灭菌法 湿热灭菌法 高压蒸气灭菌法 最有效的灭菌方法 121℃ 20～30分钟 煮沸消毒法 水煮100℃ 5分钟(繁殖体)～2小时(芽胞) 流通蒸汽消毒法 巴氏消毒法 间歇蒸汽灭菌法 水蒸汽100℃ 15～30分钟(繁殖体) 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 较低的温度（61℃ 30分钟）杀灭致病菌 湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 原因 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热大 3、湿热的蒸汽有潜热 手提式高压锅 辐射杀菌法 紫外线 杀菌机理： 波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用 干扰DNA的复制与转录 紫外线穿透力较弱 特点： 应用范围： 空气及不耐热物品的表面消毒 杀菌机理： 应用范围： 电离辐射 包括高速电子、X射线和 γ 射线 产生游离基,破坏DNA。 一次性医用塑料制品的消毒 食品的消毒不破坏其营养成分 滤过除菌法 用机械性阻挡除去液体或空气中的细菌 滤菌器 含有微细小孔0.22微米,只允许液体或气体通过, 而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 适用范围 血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌 滤菌过程 低温与干燥 在低温状态下真空抽去水分 用途：保存菌种 冷冻真空干燥法： 二、化学消毒灭菌法 龙胆紫 干扰氧化、抑制繁殖 染料 新洁而灭 蛋白变性，细胞膜损伤 表面活性剂 过氧乙酸、碘酒 氧化、蛋白沉淀 氧化剂 红汞、硫柳汞 氧化、蛋白酶变性 重金属盐 高锰酸甲 氧化、蛋白沉淀 氧化剂 乙醇 蛋白变性 醇类 石炭酸 蛋白变性，细胞膜损伤 酚类 常用种类 作用机制 类别 常用消毒剂种类 各种消毒剂的应用 用 途 使用浓度 种类 皮肤消毒 2%~2.5% 碘酒 皮肤消毒、手术部位消毒 0.1%~0.2% 硫柳汞 手术洗手、浸泡手术器械 0.4%~1.6% 新洁而灭 皮肤、粘膜、小创伤消毒 2%~3% 红汞 皮肤、体温计消毒 70%~75% 乙醇 浅表创伤消毒 2%~4% 龙胆紫 塑料、玻璃器材消毒 0.2%~0.3% 过氧乙酸 皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒 0.1%~1% 高锰酸甲 地面、器具表面、皮肤消毒 3%~5% 石炭酸 影响消毒剂作用的因素 消毒剂 细菌 环境 种类 浓度 作用时间 菌龄 种类 有机物 温度 酸硷度 选择适当的消毒剂 低毒 价廉 低破坏 易贮藏 方便 有效 一、病原微生物的分类 1.分类：分4类 2. 分类依据： 　　《人间传染的病原微生物名录》 　　　　中华人民共和国卫生部 　　　　２００６年１月１１日 生物安全的菌（毒）种分类： Ⅰ类：感染后症状严重，危及生命，缺乏有效预防 措施，易造成实验室污染，包括国内未出现 过的。鼠疫杆菌、霍乱弧菌、炭疽杆菌和HIV Ⅱ类：感染后症状较严重，可危及生命，不易治疗， 可造成实验室污染。麻风分枝杆菌、结核分枝 杆菌、肝炎病毒、出血热病毒，狂犬病毒等。 1，2类为高致病性 Ⅲ类：感染后症状较轻，有防治措施，一般不引起实 验室污染。脑膜炎球菌、白喉杆菌、流感病 毒、麻疹病毒、风疹病毒等 Ⅳ类：弱毒和减毒的菌（毒）种，常用于制备疫苗。 二、病原微生物实验室的分级 1. 生物安全(biosafety)：是指可避免生物危险因子 使实验人员暴露及造成危害、向实验室外扩散及造成危害、和被恶意使用。 2.生物安全防护水平(biosafety level, BSL)：是根据生物危险因子的危害程度，所要求的保障条件或设施，分 1~4级（BSL1-4）。 3.分类依据： 　　《病原微生物实验室生物安全管理条例》 　　　　 中华人民共和国国务院 　　　　 ２００4年１1月5日 一级、二级实验室（BSL-1，BSL-2）： 不得从事高致病性病原微生物实验活动 三级、四级实验室（BSL-3，BSL-4）： 可从事高致病性病原微生物实验活动，但应经批准。