高淋巴系统转移能力小鼠肝癌细胞株差异表达基因筛选.pdfVIP

史堡盟擅盘查2Q堕生3旦筮盈鲞箜3塑逝!』鱼型：幽塑』：型望：塑!：3 ．基础研究． 高淋巴系统转移能力小鼠肝癌细胞株差异 表达基因的筛选 崔晓楠唐建武侯力 宋波刘基巍 【摘要】 目的筛选高淋巴系统转移能力小鼠肝癌细胞株差异性表达基因。方法应用抑制性 消减杂交(sSH)技术，构建高淋巴系统转移能力小鼠肝癌细胞株Hca．F及其同源低转移细胞系Hca．P 的cDNA消减杂交文库，筛选阳性克隆进行测序，并在GeIlBank数据库中进行同源性比较。结果成 功克隆10个差异基因片段，其中2个为新基因。结论ssH技术是克隆差异表达基因及发现新基因 的有效方法。 【主题词】抑制性消减杂交技术；肝肿瘤；肿瘤转移；克隆；cDNA sc№响g 伽胁黝+，删胁加“， 月Du丘，跚助， 咖删c㈣ 删弦谢。’籼矿 JJ鲫J，∞m 踟∞魄y，打圮J时锄钉池甜凰印缸以矿删彘m尬池以￡，，瘟脚，妙，眈如n Go懈po磁愕础胁：殂ⅣG．，如胁肌，Bm蒯：．如删蜘酱@J卯．删 Toscreen in ascitesceⅡHne 【A1】st瑚cct】obj删ve expressed genes删‰Iniallynlou∞hepa眦arcinoma witll A k小pofentialoflymphaticme鲥asis．Ⅳld量10dssubtractedcDNAlib瑚ryofmousehelⅪtocarcin啪ceu linewidl of Hca-F andits ceⅡli∞Hc丑-Pwi山lowmeta8t娟c hi幽pote响al1ympha血metastasissyllogenetic potentialwascon曲兀】ctedbvsuppressionsubm帕tivehv艄di盟tion(SsH)Inethod．Thescreerledck帆esoftlIe sIlb舰cted were and was library search djⅡ醌r岫aⅡy sequencedGenB枷【homo】qw perf抽ned．Ra舡№Ten were 0fwllichwere ol埘ned，tWo 唧ressedcDNA衄妒心ofHca．F删1}li曲p呲e埘al0f】珊pha6c掣eadiIIg idemmedones．Cbnd嘀∞SSHisausefm to diⅡ白Endal an newly tec}lIliquedetect霉e嘲0f e1印l伪8i伽锄d e珏bctiveme山odtoclonerlovel genes． subtractive “ver hy硫diza旧on； 【sI】螂words】Suppression neoplasm；NeopIasIn衄删s； (=lone：cDNA 肿瘤转移机制的研究已进入多基因时代，目前 材料与方法 已克隆鉴定的转移相关基因远不能揭示作用在恶性 肿瘤转移各个阶段的分子信息，因此高通量筛选肿 瘤转移相关基因成为学界瞩目的热点。Hca．F和Hca．P由大连医科大学病理教研室白建并冻存[1I。 Hca．P是一对来自同一小鼠肝癌细胞克隆的不同亚615近交