2,4一二硝基氟苯柱前衍生化法测定复方氨基酸注射液HPLC色谱条件优化.pdfVIP

． ．— — 762—··— 药物分析杂志ChinJPharmAnal2005，25(7) 2，4一二硝基氟苯柱前衍生化法测定复方 氨基酸注射液HPLC色谱条件的优化 付宜和 ，杨国庆 ，龚道芬 ，袁 尚仪 ，史大军 ，黄公民 ，汪汶 (1．宜昌市药品检验所 宜昌 ~3003；2．湖北宜药集团有限责任公司 宜昌 ~3003) 摘要 目的：建立2，4一二硝基氟苯柱前衍生化法测定复方氨基酸注射液(18AA)含量的HPLC方法。方法：以正交回归试验， 考察色谱条件(柱温27—29℃、流动相缓冲液的pH8．2—9．2和磷酸盐浓度0．008—0．014mol-L。’)对各氨基酸分离度的影 响。结果：最佳色谱条件：柱温28℃，流动相缓冲液pH8．2和磷酸盐浓度0．014mol-L～。结论：本法能很好地分离 18种复 方氨基酸，含量测定准确，重复性好。 关键词：2，4一二硝基氟苯；测定；复方氨基酸；HPLC；优化 OptimizationofHPLC ConditionforDeterminationof CompoundAminoAcidsInjectionDerivedwithDNFB FU Yi—he ，YANG Guo—qing ，GONG Dao—fen ，YUAN Shang—yl～， SHIDa—jun，HUANGGong—min，WANGWen (1．YichangInstituteforDrugControl，Yichang443003China；2．YiyaoPharmaceuticalGroupLTD，Yichang443003，China) Abstract Objective：T0separateanddeterminethecompoundaminoacidsinjection(18AA)nadestablishhtede— terminationmehtod．M e~od：Theorthogonaltest—pluralisticregressionmethodwasusedna dstudyinghteeffectsof columnoventemperature27—29oC．pH 8．2—9．2andphosphateconcentration0．0O8—0．014 otol·L一 inmo。 bilephase．Results：ThebestHPLC condition：columnoventemperature28℃ ，pH 8．2nadphosphateconcentra— tion0．014mol·L inmobilephase．Conclusion：Themehtod iSaccuratewiht goodreproducibilityandcanbe usedforcompoundaminoacids(18AA)detemrination． Keywords：DNFB；determination；aminoacids；HPLC；optimization 复方氨基酸注射液 (18AA)用于蛋 白质的摄 外 一可见分光光度检测器；SP4290积分仪；柱温控 入不足、吸收障碍等氨基酸不能满足机体代谢需 制器(自制)。 要的患者。它们是构成蛋 白质的主要成分，在医 试剂：乙腈为色谱纯，磷酸氢二钠、磷酸、碳酸氢 学上，广泛用于治疗各种疾病 ，特别是复方氨基酸 钠为分析纯，2，4一二硝基氟苯 (DNFB)为生化试剂 注射液作为营养药品，应用 日益广泛。本法改进 (经减压重蒸馏)。 了HPLC2，4一二硝基氟苯柱前衍生化法测定复方 样品：复方氨基酸注射液 (18AA)，宜昌三峡药 氨基酸注射液(18AA)含量方法HJ，选用了新的流 业有限公司：00O4O4；湖北八峰氨基酸有限公 司： 动相成分和比例，对影响分离的诸因素做回归正 000702，000802。 交优化试验。通过试验 ，明确了各因素对不同的 对照品：18种氨基酸进 口原料 (日本协和发酵 氨基酸保留时间的影响，优选出了最佳分离条件，