温度变化对河蚬(Corbiculafluminea)几种免疫指标的影响.pdfVIP

温度变化对河蚬(Corbicula fluminea )几种免疫指标的 影响 赵冲，王庆志 大连水产学院生命科学与技术学院，辽宁大连（116023 ） E-mail ：zhaochong2004@126.com 摘 要：水温由 12℃迅速改变到 30℃，1h 后回复到 12℃，然后在不同时间测定河蚬消化腺中过 氧化氢酶(CAT) 、超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性和丙二醛(MDA)的含量。结果表明，升温回复后 CAT 、SOD 活性略有升高，然后显著下降（P0.05 ），5h 后 SOD、CAT 活性显著低于对照值 （P0.05 ）；MDA 值回复 1h 后下降显著（P0.05 ），此后MDA 值逐渐升高，回复 10h 后基本 与对照值相似（P0.05 ）。该结果表明，较之低温（12℃），高温（30℃）环境可能更利于河蚬 的免疫生理活动。但骤升温度最终会导致其抗氧化防御系统一定程度的破坏。 关键词：河蚬，SOD，CAT ，MDA ，自由基 河蚬(Corbicula fluminea)是一种重要的淡水经济贝类，属广温种，广泛分布于我国南北各 江河、湖泊、沟渠等淡水水域，具有较高的营养价值和一定的医疗保健作用[1] 。近年来在我国 南方许多地区已开展了河蚬的增养殖工作，并取得了良好的经济效益。大量研究发现,水温是 影响水产动物机体的生理功能和免疫防御能力的重要因素[2,3,4] 。但温度变化对贝类免疫系统影 响的研究鲜有报道，本文通过改变水体的温度后回复，然后在不同时间测定河蚬消化腺中过氧 化氢酶(CAT) 、超氧化物歧化酶(SOD) 的酶活性和丙二醛(MDA) 的含量，并比较温度变化对 这些免疫化学指标的影响。从而从免疫学角度分析温度变化下河蚬的生理状况及其作为生物指 示物的可能性，并初步探讨河蚬这一广温水生动物的更适养殖温度，为河蚬的养殖生产提供一 定的理论依据。 1. 材料与方法 1. 1 材料 实验所用河蚬2005年5月采自辽宁省东港市大洋河，后暂养于大连水产学院重点实验室。 壳长在25～30mm，体质健壮。 1. 2 方法 1.2.1 培养温度的改变 水温由12℃迅速升到30℃，1h后回复到12℃，然后分别于0、1、2 、5和10h 取样进行各指 标的测定。 1.2.2 样品制备 将河蚬在冰盘上解剖后，迅速取出消化腺，置于-80℃冰箱中保存备用。测定各免疫指标 前，将消化腺冰上匀浆后，用蒸馏水稀释10-15倍，匀浆液以4 ℃ 20000r/min离心20min ，弃沉 淀，取上清液用于测定相关免疫指标。 1.2.3 蛋白含量测定 按照考马氏亮兰(G2250) 法进行测定。以牛血清白蛋白为标准品,绘制标准曲线,根据标准 - 1 - 曲线测得样品的蛋白含量。 1.2.4 CAT 的测定 采用钼酸胺比色法[5] 。CAT 的活性定义为:每分钟分解1µmol的过氧化氢即为1个酶活力单 位（U ）。 1.2.5 SOD 的测定 按照邻苯三酚自氧化法[5]进行。酶活性单位定义：每 ml 反应液中，抑制邻苯三酚自氧化速率 达 50 ％的酶量定义为一个酶活性单位（U/ml ）。 1.2.6 MDA 的测定 MDA 含量采用硫代巴比妥酸(TBA) 比色法进行测定(MDA 测定试剂盒，南京建成生物工程研 究所) 。 1.2.7 数据处理 用 Origin 7.0 处理数据并进行方差分析。 2. 结果 2. 1 骤然升温后回复温度对河蚬消化腺SOD活性的影响 测定结果见表一，温度升高后，SOD 活性略有升高，2h 后回复到原来水平，然后显著下降 （P0.05 ）。5h 后基本稳定（P0.05 ）。10h 后 SOD 活性显著低于对照值（P0.05 ）。 2. 2 骤然升温后