温度对发酵生产透明质酸的影响68407.pdfVIP

氨基酸和生物资源2010，32(1)：1—4 AminoAeidf＆BioticResourcea 温度对发酵生产透明质酸的影响 吴明霞1，邓静2，吴华昌2 (1宁德师范高等专科学校福建宁德352100；2lⅡt)al理工学院四川自贡643000) 摘要：为进一步提高兽疫链球菌透明质酸产量，本实验采用分阶段控制温度工艺，当温度由36℃培养到28h转入380C培 养至发酵结束，其透明质酸产量有很大提高。经发酵罐验证温度优化结果，其粗品产量由684 g提高到735g。 关键词：透明质酸；温度；发酵罐 中图分类号：Q93 文献标识码：A 文章编号：1006-8376(2010}01一oooi—04 透明质酸(HyaluronicAcid，简称HA)是由B—取斜面保藏的原始菌种接种于新鲜种子培养基 N h。取5 D一葡萄糖醛酸和B…D 乙酰氨基葡萄糖的 上，于37℃培养14—16 mL无菌水洗脱斜 双糖单位反复交替连接而成的连锁状高分子物 面，经4500 rain，去上清液；用无菌水洗涤 g离心10 质…，是链球菌、绿脓杆菌等类菌株荚膜的主要成 沉淀2次，重新悬浮于5mL无菌水中，摇匀后倒入 分。目前，透明质酸的生产方法逐渐由动物组织提 盛有45mL无菌水的100mL三角摇瓶中，振荡10 取法转向微生物发酵法。细菌发酵法生产透明质酸 mino 具有产量不受原料资源限制、成本低、产量高、有较 1．2．2菌株筛选方法 高的相对分子量，分离纯化工艺简便，易于大规模生 分别取45mL液体培养基于250mL三角摇瓶， 产等特点成为透明质酸生产的发展方向。 r·rain_ mL，37℃下250 起始pH值7．5，菌悬液5 目前对透明质酸产生菌发酵的研究大多处于恒 培养，分别做3次平行实验，测定其菌体量及透明质 温控制阶段，本实验以经复合诱变的兽疫链球菌 酸产量。 (Streptococcus zooepidemicus)作为透明质酸产生菌对 1。2。3发酵罐培养 其摇瓶发酵温度工艺进行优化，使用发酵罐进行验 种子培养：取200mL培养基于500mL三角摇 证实验，考察分阶段控制温度工艺对透明质酸产量 r· 瓶，起始pH值7．5，菌悬液5mL，370C下250 的影响，从而选取最佳发酵工艺，为工业化生产提供 min“培养12h。 指导。 。 发酵培养：将种子培养基在无菌条件下接种于 装有25L培养基的30 L发酵罐中培养，起始pH值 l材料及方法 7．5。初始转速50r·min～，随粘度变化调节转速， 1．1材料 pH值缓慢下降时结束培养。 1．1．1菌种