含T细胞表位与B细胞表位的抗O型FMDV基因工程疫苗诱导豚鼠产生免疫反应X.pdfVIP

( ) 第 39 卷 　第 5 期 复 旦 学 报 自然科学版 Vol. 39 No. 5 2000 年 10 月 Journal of Fudan University (Natural Science) Oct . 2000 　　文章编号 (2000) 含 T 细胞表位和 B 细胞表位的抗 O 型 FMD V 基因工程疫苗诱导豚鼠产生免疫反应 1 1 1 1 2 2 1 杨志军 , 林　焱 , 李光金 , 严维耀 , 徐泉兴 , 尤永进 , 郑兆鑫 ( 1. 复旦大学 生命科学学院 ,上海 　200433 ; 2. 上海市农业科学研究院 畜牧兽医研究所 ,上海 　201106) 摘 　要 : 用 FMDV 疫苗免疫接种是预防口蹄疫的主要手段之一. 研制既含 B 细胞表位又含 T 细胞表位的基因 ( ) 工程疫苗对口蹄疫的防治具有更强的保护能力. 用化学方法合成 O 型口蹄疫病毒 FMDV 外壳蛋白 VP1 中21 β ～40 位肽段的 T 细胞表位基因 ,与 141～160 肽段的 B 细胞表位基因串联后 ,与 半乳糖苷酶基因相连 ,构建成 一重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达出融合蛋白疫苗. 动物实验表明 ,该疫苗不仅能诱导豚鼠产生滴度很高的中 和抗体 ,而且产生大量对病毒专一性 T 细胞 ,与不含 21～40 肽段的疫苗相比 ,用该疫苗免疫的豚鼠血单个核细 胞对 FMDV 的反应性提高 7 倍以上 ,并能抵抗病毒攻击. 说明该疫苗可同时激活体液免疫及细胞免疫反应 ,有 较强的保护作用. 关键词 : 口蹄疫病; T 细胞表位 ; B 细胞表位 ; 疫苗 ; 免疫 中图分类号: Q 789 　　　　文献标识码 : A ( ) 口蹄疫 FootandMouth Disease , FMD 是世界上最为严重的家畜传染病之一 ,其危害极大 , 目前的主 ( ) 要预防手段为免疫接种. 口蹄疫的致病原为口蹄疫病毒 FMDV ,属小 RNA 病毒科口蹄疫病毒属 ,有 7 个血清型. FMDV 结构较简单 , 由 1 分子单链 RNA 及 4 分子外壳蛋白即 VP1 ,VP2 ,VP3 ,VP4 组成 ,其中 VP1 是主要的抗原蛋白[1 ] . 除体液免疫外 ,细胞免疫在预防 FMDV 感染中亦起着重要作用 , 同时激活体液免疫及细胞免疫可降 低口蹄疫发病的危险及传播[2 ] . 在抗原肽中连上合适的 T 细胞表位 ,可使原先不能对抗原肽产生免疫应 答的豚鼠、猪等产生免疫应答[3 ,4 ] . 因此 ,研制既含 B 细胞表位又含 T 细胞表位的蛋白疫苗可更好预防口 蹄疫的发生. FMDV VP1 中的 141～160 位氨基酸肽段是决定 FMDV 免疫原性的主要B 细胞抗原表位[5 ] ,21～40 位氨基酸肽段则是一重要 T 细胞抗原表位[6 ] . 本室已成功研制出一种抗 O 型 FMDV 基因工程疫苗 ,该疫 苗含 VP1 中2 个 141～160 及一个 200～213 共